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PuriMag 磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒

普睿迈格生物科技有限公司

会员指数：

企业认证：

价格：电议

所在地：福建厦门市

型号：PuriMag

更新时间：2024-09-10

浏览次数：1040

公司地址：厦门集美杏林营运中心2楼

15805933710 许慧(先生)

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产品简介

磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒是普睿迈格生物科技有限公司新研制的一种细菌基因组DNA提取试剂盒。

公司简介

厦门普睿迈格生物科技有限公司是一家专注于发展纳米材料及生物医药技术的高科技创新型公司，旨在生命科学、生物医药、生物检测领域开发新的纳米材料及其应用技术和产品，并为相关领域提供技术服务与支持。公司研发和生产基地位于福建省厦门市集美杏林湾，紧临中科院城市环境研究所和华侨大学。福建省厦门市产业技术创新大厦，所处地理位置优越，交通便利，环境优雅。普睿迈格生技以国际领先的生物纳米表面技术和高效生物试剂技术为核心，专注于开发高端细胞培养、特异性标记与捕获，蛋白快速分离与纯化，核酸提取与文库构建，及高通量、自动化生物样本处理综合技术平台，目前已经发展成为一家集自主研发、规模化生产和销售服务于一体的生物医学工程领域高科技企业。普睿迈格生技秉承“创新以科技研发为本”的核心价值观，致力于打造我国磁性颗粒在生物分离纯化领域的领导品牌。公司拥有较强的科研力量和完善的管理体系，公司拥有多项自主开发的专利技术，产品包括磁性纳米颗粒、介孔纳米材料、磁性微球等，为医学影像诊断的磁共振造影、细胞及生物分子的标记以及蛋白和细胞分离纯化、生物分子和药物装载等领域提供新型、高效的产品和解决方案。公司下设有科技研发中心、应用工程中心、产品制造中心、市场销售中心等四个主要机构。公司拥有良好的经营环境和高素质的专业人才，有研究员2人、教授4人、高级会计师2人、博士后2人、高级工程师4人、工程师9人、助理工程师15人、研究生25人。大专以上学历的职工占总体的98％以上。

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产品说明

【产品介绍】

磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒是普睿迈格生物科技有限公司新研制的一种细菌基因组DNA提取试剂盒。本产品采用Lysis Buffer和Proteinase K裂解细菌细胞，释放出基因组DNA，在结合液的作用下磁珠选择性的吸附裂解液中的基因组DNA。通过洗涤液的清洗完全除去磁珠吸附的少量杂质。在Elution Buffer的作用下Purimag Beads释放吸附的基因组DNA，即获得高质量的基因组DNA。从1ml的菌液中可以获得10~20 µg DNA，OD260/OD280比值一般为1.7~1.9，抽提的DNA可直接用于下游实验。适用于手工细菌基因组DNA的提取，可配合各类磁棒式核酸提取仪或自动化/半自动化工作站。

【特点】

l 耗时少：细菌DNA提取周期在50分钟左右；

l 操作简便：提取过程无需离心；

l 无害：试剂中不含有有毒物质；

l 效果稳定：OD260/OD280稳定在1.7-2.0之间，获得细菌基因组DNA的纯度更高；

l 自动化：可以同时处理多个样品，实现细菌基因组提取的高通量化和自动化。

【保存方法及注意事项】

请将试剂盒中的PuriMag Beads、Proteinase K和RNase A置于2-8℃保存，其余试剂室温保存，有效期详见包装。

l 严禁冰冻、离心。冰冻、离心可能会对磁珠造成不可逆的损害。

l 磁珠长期放置后会聚集成团，从而使磁珠表面积减小，降低样品回收得率，使用前一定要涡旋振荡彻底混匀磁珠（通常需涡旋振荡20秒）。

【试剂盒组成】

组分	100次	保存
Lysis buffer	20 ml	常温
Binding buffer	18ml	常温
Wash buffer	75%乙醇（用户自备）	常温
Elution buffer	10 ml	常温
PuriMag bead	2 ml	2-8℃
RNase A	2 ml	2-8℃
蛋白酶K	1 ml	2-8℃
溶菌酶	2 ml（选配试剂）	2-8℃
异丙醇	用户自备	常温

DNA浓度及纯度检测：（1）得到的基因组DNA片段大小与样品保存时间、操作过程中剪切力等因素有关，所得DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度和纯度。（2）DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260=1相当于大约50ng/ul双链DNA，40ng/ul单链DNA。OD260/OD280比值应为1.7~1.9，如果洗脱时使用去离子水，比值会偏低，因为pH和离子会影响吸光度，并不表示纯度低。

【操作步骤】

分菌→	1) 牙签挑取平板菌落（1 mm）或取过夜培养细菌1 ml（细胞数为10⁸-10⁹）加入1.5 ml离心管。9000 rpm离心1 min，弃上清。（可选步骤：对于革兰氏阳性菌，加入200 ul溶菌酶溶液重悬菌体，37 ℃水浴30~60 min。对细胞壁较厚的革兰氏阳性菌，如金黄色葡萄球菌，可补加溶葡球菌酶助破壁。离心后备用。）
裂解→	2) 加入200 ul Lysis buffer摇匀，漩涡振荡混匀，室温温育10分钟至溶液变粘稠；加入10 ul蛋白酶K，漩涡振荡器混匀，56 ℃消化30 min。（可选步骤：若革兰氏阳性菌溶液浑浊未消化完全，可12000 rpm离心2min后取上清使用。）
除RNA→	3) 加入20 ul的 RNase A, 漩涡振荡混匀，室温温育10分钟以除去RNA。
除蛋白→	4) 向离心管中加入180 ul Binding buffer，漩涡振荡1-2 s。
结合→	5) 取400 ul试样加入磁珠悬液中（20 ul的 PuriMag bead和280 ul的异丙醇在一个新离心管中先预混），静置5分钟后，于磁力架上磁分离20 s，去上清。
洗涤→	6) 向离心管加入700 ul Wash buffer，移液枪缓慢吹打混匀，磁力架上静置20 s，小心吸弃上清（重复该步骤2次）。倒置离心管2-3 min，室温晾干5 min，让残留乙醇挥发干净，以免影响后续实验。
洗脱→	7) 向离心管加入50~100 ul Elution buffer，缓慢吹打混匀1~2 min。（Elution buffer在65~70 ℃中预热后洗脱效果更好，减小洗脱体积或多次洗脱可增大DNA浓度）离心管磁力架上静置0.5 min，小心吸走上清放入新离心管即为提取的DNA，存放于2-8 ℃，长期存放需置于-20 ℃。提示：本试剂盒仅限科研用途。