PuriMag GST融合蛋白分离磁珠

GST融合蛋白分离磁珠

厦门普睿迈格生物科技有限公司是一家专注于发展纳米材料及生物医药技术的高科技创新型公司，旨在生命科学、生物医药、生物检测领域开发新的纳米材料及其应用技术和产品，并为相关领域提供技术服务与支持。 公司研发和生产基地位于福建省厦门市集美杏林湾，紧临中科院城市环境研究所和华侨大学。福建省厦门市产业技术创新大厦，所处地理位置优越，交通便利，环境优雅。普睿迈格生技以国际领先的生物纳米表面技术和高效生物试剂技术为核心，专注于开发高端细胞培养、特异性标记与捕获，蛋白快速分离与纯化，核酸提取与文库构建，及高通量、自动化生物样本处理综合技术平台，目前已经发展成为一家集自主研发、规模化生产和销售服务于一体的生物医学工程领域高科技企业。 普睿迈格生技秉承“创新以科技研发为本”的核心价值观，致力于打造我国磁性颗粒在生物分离纯化领域的领导品牌。公司拥有较强的科研力量和完善的管理体系，公司拥有多项自主开发的专利技术，产品包括磁性纳米颗粒、介孔纳米材料、磁性微球等，为医学影像诊断的磁共振造影、细胞及生物分子的标记以及蛋白和细胞分离纯化、生物分子和药物装载等领域提供新型、高效的产品和解决方案。公司下设有科技研发中心、应用工程中心、产品制造中心、市场销售中心等四个主要机构。 公司拥有良好的经营环境和高素质的专业人才，有研究员2人、教授4人、高级会计师2人、博士后2人、高级工程师4人、工程师9人、助理工程师15人、研究生25人。大专以上学历的职工占总体的98％以上。

1. 产品描述

1.1 产品用途

谷胱甘肽修饰磁珠PuriMag Si-GSH 非常适合用于小型规模的GST标签融合蛋白质纯化。

1.2 原理

把含有GST标签的融合蛋白添加到PuriMag Si-GSH磁珠中，在经过短暂的孵育后，重组蛋白将被吸附到磁珠上，然后可使用磁珠分离架把GST融合蛋白洗脱下来。磁分离技术消除了微管的变化、zui大限度地减少样品的损失和消除繁杂传统离心方法的步骤，而且适合于自动化操作。

1.3 材料的描述

PuriMag Si-GSH磁珠是由还原型谷胱甘肽共价结合在的400nm的超顺磁性微球表面组成，表面二氧化硅层可zui大限度降低非特异性蛋白的吸附。磁珠储存在含有20%乙醇的PBS（PH=7.4）中，每1mg磁珠能够吸附超过40ug以上的GST标签融合蛋白。

1.4 产品保存

产品能够2-8℃稳定存储，避免冷冻。在存储和所有操作中保证磁珠浸没液体中，干燥的环境会导致吸附量的下降或丧失。使用前应充分悬浮磁珠，避免细菌和真菌污染。
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2. 操作流程

该说明书以100 μl的 PuriMag Si-GSH磁珠为例，您可根据需要进行放大或者缩小。

2.1 细胞破碎液和缓冲液准备

从大肠杆菌细胞中制备含有GST标签的重组蛋白，可采用高压匀浆或超声破碎等方法。

过程所需缓冲液：（1）上样Buffer/洗杂Buffer: 1x PBS pH=7.4 （2）洗脱Buffer: 10mM GSH（还原型谷胱甘肽）, 50mM Tris，pH 8.0

2.2 使用前准备

1）充分摇匀磁珠。

2）取100μl磁珠到一个干净的管中。

3）把管放置在磁力架上收集磁珠，去上清液。

4）加入1ml 洗杂/上样Buffer充分混匀后，放置在磁力架上收集磁珠，去上清液。重复该次步骤2次。

2.3 融合蛋白结合

1)        用100μl的上样Buffer/洗杂Buffer重新悬浮磁珠。

2)        加入含有GST标签重组蛋白的样品轻轻混匀。

3)        放置在振荡器或摇床中在室温下孵育30-60min（如果重组蛋白在室温下不稳定，可以再4℃进行）。

4)        把孵育后的小管放置在磁力架上收集磁珠，去上清液。如果有需要可保留上清，另作检测。

5)        加入1ml 洗杂/上样Buffer充分混匀后，放在磁力架上收集磁珠，去上清。重复该次步骤至少3次。

2.4 目的蛋白洗脱

1)        加入100μl洗脱Buffer重新悬浮磁珠，放置在振荡器上室温震荡5min

2)        使用磁力架收集磁珠，把上清转移到另一个干净的管中。

3)        重复步骤1和步骤2.

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