人血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒操作步骤

  人血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒的含量。

  实验原理：

  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒水平。用纯化的人血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒，再与HRP标记的血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒浓度。

  操作步骤

  1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

  2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

  3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

  4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

  5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

  6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

  7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

  实验结果计算

  以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。