当前位置: 首页 » 资料 » 操作维修手册

文献:L型细菌高渗盐增菌培养基使用方法

Word文档
  • 文件类型:Word文档
  • 文件大小:0.02M
  • 更新日期:2023-02-03 13:45
  • 浏览次数:129   下载次数:115
进入下载
详细介绍
产品名称:L型细菌高渗盐增菌培养基

英文名称:L-Bacterial Hypertonic Salt Broth

供应商:远慕生物

规格:250g

保质期:3年

用途:用于L型细菌的增菌培养。

用法:称取本品 65g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。

相关培养基的配制:

1)、Camp-BAP固体培养基的配制:

称取8.92g培养基,溶于200ml蒸馏水中高压灭菌,待冷却至55°C左右加入200ul添加剂A、200ul添加剂B和10ml脱纤维裂解羊血,充分摇匀后倒平板。(添加剂A和B为购买附带)。

2)、Skirrow固体培养基的配制:

称取8.5g培养基,溶于200ml蒸馏水中高压灭菌,待冷却至55°C左右加入2ml FBP原液和10ml脱纤维裂解羊血,充分摇匀后倒平板。

FBP原液配置:

分别称取0.5g焦亚硫酸钠、0.5g丙酮酸钠和0.5g硫酸亚铁,溶于20ml蒸馏水中,滤膜过滤除菌,放置4°C冰箱可保存一周。

3)、布氏肉汤增菌液的配制:

称取28.1g布氏肉汤粉末,溶解于1000ml蒸馏水中高压灭菌,冷却后备用。

2、增菌培养

宽鳞大孔菌将新鲜食品,如鸡肉,减碎,取5g置于50ml离心管中,加入布氏肉汤至液面覆盖鸡肉样品,拧紧离心管,先在37°C下预增菌4小时,在加入100 ul头孢哌酮(30mg/ml),并颠倒混匀,放置在微需氧培养箱中42°C培养48小时。

3、分离纯化

用接种环沾取增菌液划线于Skirrow血平板上,在平板上挑取不溶血、灰色、有光泽、且边缘整齐发亮的菌落在Camp-BAP平板上纯化,挑取扁平、灰色、像水滴样菌落多次纯化后保存。

4、菌株培养

将纯化的弯曲杆菌单菌落接种到Skirrow血平板上,放置在42°C的微需氧环境下培养48小时,观察细菌生长状态。微需氧条件的创造可用微需氧产气袋和密闭培养罐,也可以用微需氧培养箱(三气培养箱)培养。

5、菌株保存方法

挑取单克隆菌株在Skirrow固体培养基上平板划线,放置在42°C的微需氧环境下培养48小时,用灭菌棉签从平板上刮下长出的菌落,悬浮在50%甘油的布氏肉汤保种液中,置于-80°C温保存。在-20°C冰箱中保存效果较差,存放一周后细菌复苏率即显著下降。此外,保存菌株需要每隔一年重新活化保存一次。
 
 
[ 资料搜索 ]  [ ]  [ 告诉好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 关闭窗口 ]  [ 返回顶部 ]

下载地址
 
  • 会员指数:
  • 企业认证:         
  • 联系人:俞燕熙(女士)    
  • 地区:上海
推荐资料
本类下载排行
总下载排行