白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫微板法)简介说明

产品名称：白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫微板法)
分类：生化检测
规格：100T
用途：用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的蛋白含量测定，该法操作简单、方法特异，既可手工操作，又可采用自动分析仪检测。
注意事项：检测原理是在酸性环境下，白蛋白分子带正电荷，与带负电荷的溴甲酚紫(Bromocresolpurple，BCP)结合生成绿色复合物，在603nm处有吸收波，该复合物的吸光度与白蛋白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准比较，求得待测样品中白蛋白浓度。

简介：
总蛋白(Total?Protein，TP)由白蛋白和球蛋白组成，检测白蛋白的方法有双缩脲法、色氨酸法、染料结合法。检测白蛋白的染料结合法可采用溴甲酚绿或溴甲酚紫染料结合，上述染料对白蛋白具有高度的亲和力，通常监测染料与白蛋白结合的初速率，该速率与样品中白蛋白浓度成正比。白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫微板法)检测原理是在酸性环境下，白蛋白分子带正电荷，与带负电荷的溴甲酚紫(Bromocresol?purple，BCP)结合生成绿色复合物，在603nm处有吸收波，该复合物的吸光度与白蛋白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准比较，求得待测样品中白蛋白浓度。本试剂盒多用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的蛋白含量测定，该法操作简单、方法特异，既可手工操作，又可采用自动分析仪检测。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

自备材料：
1.离心管、小试管
2.96孔板
3.酶标仪

操作步骤（仅供参考）：

1.取白蛋白标准配制液或稀释液加入到白蛋白标准中，充分溶解后配制成40mg/ml的白蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的白蛋白标准溶液应-20℃保存。亦可按自己试验要求继续进行稀释，如稀释至1mg/ml。特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，白蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。例如待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取白蛋白标准溶解于蔗糖中。一般也可以用NaCl或PBS作为溶解白蛋白标准品的稀释液。

2.样本处理：血清、血浆样本直接取检测。对于组织样本，组织质量(g)：生理盐水比例，加入生理盐水或PBS，冰浴下匀浆后，离心，取上清待检。

3.白蛋白加样操作，按下表依次加入试剂：
加入物（μL）                         空白孔    标准孔   待测孔
白蛋白标准配制液                    5        -        -
白蛋白标准溶液（40mg/ml）            -       5        -
待检样品（血清、血浆、组织匀浆液）    -       -        5
BCP试剂                            250      250     250

4.先在酶标仪处以空白管调零，逐管加入BCP试剂，并立即混匀。

5.放置(30±3)s，读取标准孔和各待测孔的吸光度。

6.当遇到脂血混浊，可设“样本空白孔"：取待测样品加入白蛋白标准配制液，予以校正。

计算：
白蛋白(g/L)=(待测孔吸光度/标准孔吸光度)×白蛋白标准液浓度(g/L)

参考区间：健康成年人    36~46g/L

注意事项：
1.白蛋白标准粉末溶解于白蛋白标准配制液后，即获得白蛋白标准原液，该原液中含有防腐剂，不影响后续检测，该蛋白标准原液-20℃长期保存。
2.如果没有分光光度计，也可以使用酶标仪测定。使用酶标仪测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著增加。
3.本法线性范围是10~50g/L，在10~40g/L呈良好线性范围。
4.CV可达0.45%，回收率可达99.3%~102%，平均回收率达100.5%。
5.该法测定正常样本的批间变异系数为6.3%。

有效期：6个月有效。白蛋白标准配制成溶液后应-20℃冻存。