Gram-Twort革兰染色液实验方法

产品名称：Gram-Twort革兰染色液
分类：微生物染色
用途：组织切片的革兰氏细菌染色
储存条件：室温,避光,12个月

简介：未经染色的细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，用以分类鉴定。通过此法染色可将细菌鉴别为革兰阳性菌(G+)和革兰阴性菌(G-)两大类。细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异，主要是肽聚糖层厚度和结构决定的。经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物，乙醇能使它脱色。Gram-Twort革兰染色液采用非经典的革兰染色配方,用到红色和绿色染料，使色彩较为丰富，背景干净，胞核胞质对比强烈，细菌染色特征典型，多用于组织切片的染色。

 操作步骤(仅供参考)：
1、组织切片梯度酒精脱蜡，蒸馏水中水化。
2、入结晶紫染色液染色。
3、清水缓慢冲洗去染色液。
4、入Gram碘液浸染。
5、自来水冲洗，吸干水分，置于高温处干燥。
6、将切片置于提前56℃预热的Twort分化液中分化，直至不再有颜色脱出为止。
7、蒸馏水冲洗。
8、入Twort染色液浸染。
9、蒸馏水冲洗。
10、将切片置于Twort分化液中分化，直至不再有红色脱出为止。该过程一般需要数秒。
11、直接用无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。

染色结果：
革兰氏阳性菌   蓝黑色
革兰氏阴性菌   粉红色
细胞核   红色
红细胞以及大部分细胞   浆绿色
弹性纤维   黑色

注意事项：
1、革兰染色的关键在于严格掌握脱色程度，脱色时间应根据经验判断。脱色过度，阳性菌可被误染为阴性菌；脱色不够，阴性菌可被误染为阳性菌。
2、待检细菌培养时间会影响染色，阳性菌培养时间过长或已死亡或细菌溶解，常呈阴性。
3、由于该染色过程复杂，未必能够显示出所有色彩。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。