改良Harris苏木素染色液注意事项

中文名称：改良Harris苏木素染色液
规格：100ml|500ml
用途：属于常规切片HE染色的明矾苏木素的一种,适用于细胞核染色,尤其适用于临床纸片染色。
注意事项：Harris苏木素染色中leagene推荐采用该试剂。细胞核染色的选择性和保存时间优于Harris苏木素染色液,对细胞核染色较深,染色一般5-8分钟,存储太久后,使用时应过滤。
储存条件：室温，12个月

简介：苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。

操作步骤（仅供参考）：
（一）石蜡切片染色
1、切片脱蜡至水
①二甲苯作用2次，每次5～10min。
②（可选）无水乙醇作用2次，每次3～5min。
③95%的乙醇3～5min
④90%的乙醇3～5min
⑤80%的乙醇3～5min
⑥自来水或蒸馏水冲洗1～3min

2、染色
①改良Harris苏木素染色液5～8min
②自来水或蒸馏水冲洗5～10s
③（可选）1%盐酸乙醇分化2～5s
④自来水冲洗20～30s
⑤（可选）弱碱性水返蓝20～40s
⑥自来水冲洗30～60s
⑦伊红染色3～5min
⑧自来水冲洗1～5s

3、脱水、透明、封固
①80%乙醇10～20s
②90%乙醇10～20s
③95%乙醇作用2次，每次1～2min。
④无水乙醇作用2次，每次2～3min。
⑤二甲苯透明3次，每次2～3min。
⑥中性树脂封片。
染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、肌纤维、胶原纤维、甲状腺胶质等呈深浅不一的红色；角蛋白、红细胞等呈明亮的橙红色。

（二）冰冻切片染色
1、乙mi-乙醇混合固定液5～10s
2、自来水冲洗2～5s
3、改良苏木素染色液滴染1～2min(可加热至50℃)。
4、自来水冲洗2～5s
5、（可选）1%的盐酸乙醇分化液2～5s
6、自来水冲洗2～5s
7、（可选）弱碱性水返蓝2～5s
8、自来水冲洗5～10s
9、伊红染色液染色2～5s
10、水洗1～2s
11、80%的乙醇1～2s
12、95%的乙醇1～2s
13、无水乙醇2～5s
14、苯酚二甲苯（1:3）2～5s
15、二甲苯透明3次，每次2～5s。
16、中性树脂封片
染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、纤维呈红色。

（三） 细胞染色
1、4%的多聚甲醛固定 10～20min。
2、自来水冲洗 2 次， 每次 2min。
3、蒸馏水冲洗 2 次， 每次 2min。
4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，作用时间应相应缩短。
染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、纤维呈红色。

注意事项：
1、切片脱蜡应尽量干净。
2、乙醇应经常换新液。
3、盐酸乙醇分化液的分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和盐酸乙醇分化液的新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够，以便彻底清洗酸。
4、乙mi-乙醇混合固定液是由乙mi和 95%乙醇等量混合而得，再加入适量乙酸，密闭保存。
5、冷冻切片染色时间尽量要短。
6、促蓝液常使用 0.2～1%氨水水溶液或 Scoot 促蓝液或 0.1～1%碳酸锂水溶液。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。