胸腺活化调节趋化因子 TARC CCL17)检测试剂盒的操作步骤

胸腺活化调节趋化因子 TARC CCL17)检测试剂盒  
操作步骤 ：

  1. 编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)

  2. 加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照(标准品)50μl。然后在待测

  样品孔先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，

  尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，

  3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

  4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

  5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。

  6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。

  7. 温育：重复操作同 3。

  8. 洗涤：重复操作同 5。

  9. 显色：每孔先加入显色剂 A 50μl，再加入显色剂 B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟

  10. 终止：每孔加终止液 50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色) 。

  11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值) 。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。