超微量ATP酶测试盒定量和使用时注意小贴士

核酸的定量

核酸的定量是超微量分光光度计使用频率zui高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链DNA、双链DNA，以及RNA。核酸的zui高吸收峰的吸收波长260nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应消光因子。如：1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算，从而得出相应的样品浓度。除了核酸浓度，分光光度计显示几个非常重要的比值表示样品的纯度，如A260/A280的比值，用于评估样品的纯度，因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品，比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0。

使用时注意小贴士：

（1）测量前将样品中度混匀（可采用震荡器或用手指弹震管底）

（2）移液器吸头插入液面下吸取样品，可避免吸入气泡；TIP头贴着下光纤表面打出样品，且只按到移液器*挡尽头，第二挡不要按，可以避免吹出气泡到样品中。

（3）每次测量完毕后，用蒸馏水清洁上下光纤端面，这样可以更好地保证下一次测量的准确性（主要针对超高浓度样品，一般样品无此要求）。

（4）每次做空白检测前一定要先用水清洁上下光纤表面，可保证空白检测准确。

（5）每次测量的核酸样品量建议为1-2微升,蛋白样品建议2微升。 过少可能无法形成水柱，过多可能溢出。

（6）加样后尽快测量，以防蒸发浓缩以及灰尘落入，已加样品不能多次检测，如需重测需重新滴加同一样品。

（7）仪器避免阳光直射，避免强风吹拂，以避免蒸发。

（8）连续测量一段时间后擦净样品，用水清洁上下光纤表面，然后用水或缓冲液进行重新空白后再检测。

（9）清洁光纤端面（上样基座）时必须用洁净质软的实验室用纸（擦镜纸等）进行轻轻擦拭。

（10）仪器不用时，将上臂放下，可以防止灰尘。