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小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒检测样品的处理方法、

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  • 更新日期:2018-08-22 16:04
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详细介绍
小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒检测样品的处理方法、
1、  血清
血清是zui常用于ELISA检测的一类样本,处理也比较简单。
用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本,将试管或离心管室温放置2小时或4℃一个晚上,使血清析出。(zui好将试管或离心管倾斜放置,使液面横截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃ 1000×g离心20分钟,仔细收集上清。建议将血清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
采血过程中应避免溶血,因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质,在以HRP为标记的ELISA检测中会有非特异性的显色,而导致检测的不准确性。同时也应避免细菌污染,因为菌体内可能含有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。
2、  血浆
用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本,标本采集后30min内4℃ 1000×g离心15min,取上清即血浆。将上清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。
常用的抗凝剂为EDTA、肝素钠和枸橼酸钠等,检测时还应仔细阅读试剂盒说明书,检查试剂盒是否对抗凝剂有特殊要求。
3、  细胞培养上清
取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
4、  细胞裂解液
1)  吸去培养板内的培养基,用胰酶消化细胞,加适量培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省略。
2)  收集细胞悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。
3)  加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。通常6孔板一个孔的细胞量需要150~250μL PBS重悬。
4)  将样品放入-20℃或-80℃,使样品冷冻,再放室温解冻样品,反复冻融几次,使细胞充分裂解。也可将样品进行超声破碎,以达到裂解的目的。
5)  4℃ 10000×g 离心10min,除去细胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
5、组织匀浆液
1)  将组织样本用PBS (0.01锚点锚点M, PH 7.4) 冲洗,洗去组织表面残留的血液或杂质。
2)  将组织块称重,记录后剪碎,碎块应尽量小,便于匀浆得更充分
3)  将组织按一定的比例加入预冷的PBS(临用前加入蛋白酶抑制剂)匀浆,匀浆时置于冰上或冰浴中。(通常按组织重量:PBS体积=1:9的比例匀浆,例如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,检测后计算样品浓度时应乘以相应的稀释倍数)
4)  吸取匀浆液到离心管,4℃ 5000×g 离心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
6、  尿液、唾液等其他液体生物样本
1000×g离心20min,取上清即可检测。
总的来说,因为ELISA只能检测可溶性蛋白的含量,所以应保证所有样本均为澄清的液体,沉淀或悬浮物都应离心去除。
为了保证检测的准确性,保存于-20℃或-80℃的样本zui好在1~6个月内检测;4℃保存的样本应在1周内进行检测。
肝素结合EGF样生长因子(HBEGF)ELISA试剂盒 ,英文名: HBEGF ELISA Kit
肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA试剂盒 ,英文名: HCⅡ ELISA Kit
肝癌抗原(PHC)ELISA试剂盒 ,英文名: PHC ELISA Kit
肝X受体β(LXRβ)ELISA试剂盒 ,英文名: LXRβ ELISA Kit
肝X受体α(LXRα)ELISA试剂盒 ,英文名: LXRα ELISA Kit
甘油三酯(TG)ELISA试剂盒 ,英文名: TG ELISA Kit
甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH/G3PDH)ELISA试剂盒 ,英文名: GAPDH/G3PDH ELISA Kit
甘油二酯(DAG)ELISA试剂盒 ,英文名: DAG ELISA Kit
甘露糖受体(MR)ELISA试剂盒 ,英文名: MR ELISA Kit
甘露糖凝集素受体(MBLR)ELISA试剂盒 ,英文名: MBLR ELISA Kit
甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素(MBP/MBL)ELISA试剂盒 ,英文名: MBP/MBL ELISA Kit
甘露糖(MN)ELISA试剂盒 ,英文名: MN ELISA Kit
甘露糖(Mannose)ELISA试剂盒 ,英文名: Mannose ELISA Kit
甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶(MASP)ELISA试剂盒 ,英文名: MASP ELISA Kit
甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽1(C4/C2 RA反应因子的激活因子)(MASP1)ELISA试剂盒 ,英文名: MASP1 ELISA Kit
甘胆酸(CG)ELISA试剂盒 ,英文名: CG ELISA Kit
甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA试剂盒 ,英文名: GAL ELISA Kit
钙转运ATP酶2C型成员1(ATP2C1)ELISA试剂盒 ,英文名: ATP2C1 ELISA Kit
钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1)ELISA试剂盒 ,英文名: CNR-1 ELISA Kit
钙依赖性胞浆型磷脂酶A2(iPLA2)ELISA试剂盒 ,英文名: iPLA2 ELISA Kit
钙网蛋白(CRT)ELISA试剂盒 ,英文名: CRT ELISA Kit
钙调素特异抗体(CAM-ab)ELISA试剂盒 ,英文名: CAM-ab ELISA Kit
钙调素(CAM)ELISA试剂盒 ,英文名: CAM ELISA Kit
钙调磷酸酶(CaN)ELISA试剂盒 ,英文名: CaN ELISA Kit
钙调结合蛋白(CALD)ELISA试剂盒 ,英文名: CALD ELISA Kit
钙腔蛋白(CALU)ELISA试剂盒 ,英文名: CALU ELISA Kit

 
 
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