兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒实验加样过程中您遇到过这些问题吗?

兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒实验加样过程中您遇到过这些问题吗?
在实验过程中加样可能会遇到一些问题，而这些问题往往会弄的大家措手不及。上海恒远为了方便大家更好的完成实验，技术人员特将实验过程中加样可能碰到的问题以及解决办法整理分析如下：
可能遇到的问题：
1、过长(特别是室内温度较高时)
2、手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间；
3、加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。.血清或血浆标本分离不好即进行加样。
相应解决办法：
1、标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。ELISA实验过程中加样可能碰到的问题
2、加样后及时放入孵箱。
3、加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4、如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5、标本较多时，请分批操作。
那么如何正确加样呢？
加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易导致非特异吸附。溅出会对邻近反应孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上都是从滴瓶中滴加，除了要注意滴加的角度外，滴加的速度也很重要，滴加太快，很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象，这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附，从而引起非特异显色。所以，有时候一份 标本用相同的试剂盒，这次测定为阳性，下次测定为阴性，往往就是上述加样及试剂的错误所致。
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