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山羊白介素4(IL-4)ELISA试剂盒 实验内标法的操作

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  • 更新日期:2018-03-05 09:23
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山羊白介素4(IL-4)ELISA试剂盒实验内标法的操作:
① 将已知量的内标样加入标准样品,制成混合标样,并配制一系列的已知浓度的工作标样。混合标样中标样与内标样的摩尔比不变。
② 注入色谱柱,以(标样峰面积/内标样峰面积)为响应值。
③ 根据响应值与工作标样浓度之间存在的线性关系,即W=f×A,制成标准曲线。
④ 将已知量的内标样加入未知样品,注入色谱柱,得到欲测组分的响应值。
⑤ 根据已知的系数f,即可求出欲测组分的浓度。
标本的处理方法:
(1)血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
(2)血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
(3)尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心,胸腹水、脑脊液参照实行。
(4)细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(5)组织标本:切割标本后,称取重量,加入一定量的PBS,PH7.4,用液氮迅速冷冻保存备用,标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
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