小鼠ELISA试剂盒双抗体夹心法

小鼠ELISA试剂盒双抗体夹心法
1. 包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。 
2. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。 
3. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。 
4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，小鼠ELISA试剂盒37℃10～30分钟。 
5. 终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 
6.结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O·D值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，小鼠ELISA试剂盒以空白对照孔调零后测各孔O·D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
实践过程技巧 1. 操作前应对实验的物理参数有充分的了解，如环境温度(保持在18 C～25℃)、反应孵育温度和孵育时间、洗涤的次数等，要先查看水育箱温度，ELISA试剂盒是否符合要求。
 2. 正确使用加样器加样器应垂直加入标本或试剂，避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅，血清残留在反应孔壁上，加样器吸头要清洗干净，避免污染，加样次序要与说明书一致，否则可导致结果错误，实验重复性差。
 2. 手工洗板加洗液时冲击力不要太大，洗涤次数不要超过说明书推荐的洗涤次数，洗液在反应孑L内滞留的时间不宜太长。不要使洗液在孑L间窜流，造成孔问污染，导致假阴性或假阳性。
 3. 要保证加液量一致ELISA试剂盒我们在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好，滴瓶不易控制加液量不准，造成显色不统一，判断错误。
 4. 显色液量不可过多 加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下，加显色系统后要避光反应，显色液量不能过多，以免显色过强。
 小鼠Ⅵ型胶原α1(COL6α1)ELISA试剂盒 ，英文名： COL6α1 ELISA Kit
小鼠Ⅴ型胶原α2(COL5α2)ELISA试剂盒 ，英文名： COL5α2 ELISA Kit
小鼠Ⅳ型胶原α1(COL4α1)ELISA试剂盒 ，英文名： COL4α1 ELISA Kit
小鼠Ⅳ型胶原(COL4)ELISA试剂盒 ，英文名： COL4 ELISA Kit
小鼠Ⅲ型前胶原氨基端原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒 ，英文名： PⅢNP ELISA Kit
小鼠Ⅲ型胶原交联羧基端肽(CTXⅢ)ELISA试剂盒 ，英文名： CTXⅢ ELISA Kit
小鼠Ⅲ型胶原(COL3)ELISA试剂盒 ，英文名： COL3 ELISA Kit
小鼠Ⅱ型前胶原羧基端原肽(PⅡCP)ELISA试剂盒 ，英文名： PⅡCP ELISA Kit
小鼠Ⅱ型前胶原氨基端原肽(PⅡNT)ELISA试剂盒 ，英文名： PⅡNT ELISA Kit
小鼠Ⅱ型胶原交联羧基端肽(CTXⅡ)ELISA试剂盒 ，英文名： CTXⅡ ELISA Kit
小鼠Ⅱ型胶原(COL2)ELISA试剂盒 ，英文名： COL2 ELISA Kit
小鼠ⅡD组磷脂酶A2(PLA2G2D)ELISA试剂盒 ，英文名： PLA2G2D ELISA Kit
小鼠ⅡA组磷脂酶A2(PLA2G2A)ELISA试剂盒 ，英文名： PLA2G2A ELISA Kit
小鼠Ⅰ型前胶原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA试剂盒 ，英文名： PⅠCP ELISA Kit
小鼠Ⅰ型前胶原氨基端原肽(PⅠNP)ELISA试剂盒 ，英文名： PⅠNP ELISA Kit
小鼠Ⅰ型前胶原(PCⅠ)ELISA试剂盒 ，英文名： PCⅠ ELISA Kit
小鼠Ⅰ型胶原交联羧基端肽(CTXⅠ)ELISA试剂盒 ，英文名： CTXⅠ ELISA Kit
小鼠Ⅰ型胶原交联氨基端肽(NTXⅠ)ELISA试剂盒 ，英文名： NTXⅠ ELISA Kit
小鼠Ⅰ型胶原α2(COL1α2)ELISA试剂盒 ，英文名： COL1α2 ELISA Kit
小鼠Ⅰ型胶原α1(COL1α1)ELISA试剂盒 ，英文名： COL1α1 ELISA Kit
小鼠Ⅰ型胶原(COL1)ELISA试剂盒 ，英文名： COL1 ELISA Kit
小鼠90kDa热休克蛋白β1(HSP90β1)ELISA试剂盒 ，英文名： HSP90β1 ELISA Kit
小鼠90kDa热休克蛋白αA1(HSP90αA1)ELISA试剂盒 ，英文名： HSP90αA1 ELISA Kit
小鼠8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒 ，英文名： 8-OHdG ELISA Kit
小鼠70kDa热休克蛋白8(HSPA8)ELISA试剂盒 ，英文名： HSPA8 ELISA Kit
小鼠70kDa热休克蛋白5(HSPA5)ELISA试剂盒 ，英文名： HSPA5 ELISA Kit
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小鼠60kD热休克蛋白(HSPD1)ELISA试剂盒 ，英文名： HSPD1 ELISA Kit
小鼠5羟色胺转运蛋白(SERT)ELISA试剂盒 ，英文名： SERT ELISA Kit
小鼠5-羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒 ，英文名： 5-HT ELISA Kit
小鼠5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA试剂盒 ，英文名： 5-HIAA ELISA Kit