小鼠ELISA试剂盒实验稀释血清的步骤

小鼠ELISA试剂盒实验稀释血清的步骤：
先把蛋白稀释一定的倍数，比如说10倍、20倍稀释（这样可以大体确定一个参数），将抗原进行一系列稀释包被微量反应板，再用一定稀释度的阳性参考血清和阴性参考血清进行孵育后洗涤，再加酶结合物进行反应，经孵育洗涤后，加底物溶液显色，终止反应后分别测定O.D值，选择O.D值≥1.0的那个抗原稀释度为适包被浓度。一般总是要选择那个O.D值稍大于1.0，而不选择小于1.0的抗原浓度。阴性参考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求阳性参考血清和阴性参考血清的O.D值有明显差别。
操作步骤：
1. 加标准品：在酶标包被板上设标准品孔，依次加入不同浓度的标准品50ul(建议每个浓度做2个平行孔)
2. 加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品40μl，然后再加样品亲和素10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：除空白孔外每孔加入酶标试剂50μl。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
大鼠中性粒细胞趋化因子(CINC)ELISA试剂盒 ，英文名： CINC ELISA Kit
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大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒 ，英文名： NGAL ELISA Kit
大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒 ，英文名： NE ELISA Kit
大鼠质膜钙ATP酶(PMCA)ELISA试剂盒 ，英文名： PMCA ELISA Kit
大鼠脂氧素A4(LXA4)ELISA试剂盒 ，英文名： LXA4 ELISA Kit
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大鼠脂肪酸合成酶(FAS)ELISA试剂盒 ，英文名： FAS ELISA Kit
大鼠脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)ELISA试剂盒 ，英文名： ATGL ELISA Kit
大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒 ，英文名： LBP ELISA Kit
大鼠脂多糖/内毒素(LPS)ELISA试剂盒 ，英文名： LPS ELISA Kit
大鼠脂多糖(LPS)ELISA试剂盒 ，英文名： LPS ELISA Kit
大鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒 ，英文名： LPL ELISA Kit
大鼠脂蛋白脂肪酶(LPL)ELISA试剂盒 ，英文名： LPL ELISA Kit
大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒 ，英文名： Lp-PL-A2 ELISA Kit
大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA试剂盒 ，英文名： Lp-PLA2 ELISA Kit
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大鼠整合素样金属蛋白酶17(ADAM17)ELISA试剂盒 ，英文名： ADAM17 ELISA Kit
大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)ELISA试剂盒 ，英文名： ITG αM/CD11b ELISA Kit
大鼠整合素α2+β1(ITGA2+ITGB1)ELISA试剂盒 ，英文名： ITGA2+ITGB1 ELISA Kit
大鼠整合素α2(ITGA2)ELISA试剂盒 ，英文名： ITGA2 ELISA Kit