大鼠白介素10（IL-10）ELISA试剂盒实验原理

大鼠白介素10（IL-10）ELISA试剂盒实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒 水平。用纯化的大鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白介素10(IL-10)ELISA试剂盒 ，再与HRP标记的白介素10(IL-10)ELISA试剂盒 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的白介素10(IL-10)ELISA试剂盒 呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒 浓度。
实验准备：
1.样本准备：在收集样本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本，及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本，及时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。
2. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的 PBS（1:3 1:5）（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。注：PBS 没有严格规定多少量做成1:3 或 1:5 的组织匀浆就可以了，PBS可用生理盐水代替，量做成1:3即可。
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