氯离子荧光探针 MEQ
Cat number：KFS173
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For Research Use o
一、产品描述
MEQ（MQAE）是一个 6-甲氧基花青苷衍生物，是细胞内的 Cl-荧光指示剂，该染料可以通过受被动扩散所控制的碰撞淬灭来检测离子浓度。目前，检测 Cl-所用荧光染料主要是 MQAE 和 SPQ，MQAE 相比 SPQ 来说对于 Cl-的浓度有更高的灵敏度和更高的荧光量子比率。
表 1.MQAE 光谱数据
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Ex |
Em |
e |
KSV |
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MEQ |
350 nm |
460 nm |
2800 cm-1M-1 |
200 M-1 |
随着浓度增加，MQAE 的发射光谱
二、产品包装
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组份 |
KFS173 |
储存条件 |
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氯离子荧光探针 MEQ |
10mg |
-20℃，避光 |
三、细胞内 Cl-的测量
MQAE 的工作液可以配制于 Krebs-HEPES 缓冲液中。Krebs-HEPES 缓冲液即为 20mM HEPES，128mM NaCl，2.5mM KCl，2.7mM CaCl2，1mM MgCl2，16mM glucose，pH7.4。MQAE 标记细胞时的浓度通常为 5-10mM。以约 800-1000 万细胞每毫升的细胞密度，在含有 5-10mM MQAE 的 Krebs-HEPES 缓冲液中孵育 30-60 分钟。通常一个探针的装载体系为 100 微升即可。随后用 Krebs-HEPES 缓冲液或其它适当溶液洗涤5次左右，即可进行相应荧光测定。详细的使用方法请参考相关文献。
以下对胞内氯离子的荧光测量[Cl-]做简要说明计算。Stem-Volmer 方程可以给出氯离子探针的荧光强度与氯离子浓度的关系：
(FO/F) – 1 = KSV[Q]
FO 是没有卤化物或其他淬灭离子时的荧光强度，F 是有淬灭剂时的荧光强度，[Q]是淬灭剂浓度，而 KSV 是 Stem-Volmer 方程常数。建议对实验体系进行校准，以得到研究用细胞类型的指示剂探针的 Ksv，利用线性回归模型分析 Stem-Volmer 方程。
Stem-Volmer 方程中的氯离子 Ksv 常数可以随着碰撞淬灭的阴离子物质的增多而明显降低，如多肽。便于校准，可以固定胞内氯离子的浓度，通过使用双三丁基氧化锡和尼日利亚菌素 10~30μM。为了保证渗透压使用阴离子不淬灭染料，取代氯离子，如葡萄糖酸。
