78833 胞浆蛋白抽提试剂盒

北京优尼康生物科技有限公司主要经营进口、国产生物科研仪器、试剂及耗材，提供技术服务的生物公司之一。现经营的品牌及相关产品如下：

德国Griner培养板、培养皿、离心管、冻存管、培养瓶、接种环、接种针等；

美国Wheaton 匀浆器、组织研磨器、双侧壁细胞培养瓶、悬浮细胞培养瓶、细胞专用搅拌器、安培瓶等玻璃仪器。

美国kimble 蓝盖瓶、匀浆器、离心管，巴氏吸管等玻璃仪器；

加拿大Labplas 的无菌采样袋、均值袋；

美国Nalgene 过滤装置、塑料广口瓶、放水桶、低温冰盒、低温标签、记号笔、离心管、冻存管、便携液氮罐、无菌培养基瓶、手动真空泵等

美国ABI PCR板、PCR管、PCR盖子、八连拍管、膜等

德国Brand 移液器，电动移液器，瓶口分配等

德国艾本德eppendorf 移液器、分配器等

法国Hyphen Biomed 的出血、凝血类试剂 ；

美国BioProducts MD 的PEDF(人眼色素上皮衍生因子)；

德国IBL international 新蝶呤试剂盒、儿茶酚胺试剂盒；

美国TYLER 的筛分仪；

BD公司的基质胶,细胞筛网等;

法国Interscience 均质器、重量稀释器、自动螺旋接种仪、均值袋、均值夹、开袋器、架子等

德国Wiggens 搅拌器、培养箱、振荡器、蒸发器（氮吹仪）菌落计数器本生灯、均质器等

德国Chemvck 防腐隔膜泵、无油泵、真空泵、蠕动泵等

瑞士Keller 小型快速玻璃珠灭菌器、玻璃珠等

美国Millpore 细胞电阻仪、超滤管、膜、针头滤器等

美国 BioSpec研磨珠均质器、手持匀浆机等

自产镍洛合金接种环、接种针、核酸染料等

使用Thermo Scientific NEPER核蛋白-胞浆蛋白抽提试剂盒可以在两小时以内分别抽提出胞浆和核蛋白组份。该方法是微量离心管方法，主要步骤包括先用含有专利去垢剂的低渗缓冲液裂解细胞，然后微量离心以便沉淀完整的细胞核，此后去除胞浆组分，终裂解细胞核。一般使用该方法所得的细胞质与细胞核组分之间的交叉污染<10%。一般从2x10⁶个细胞中能够抽提出胞浆蛋白200-500μg，细胞核蛋白100-200μg（浓度>1mg/ml）。可以通过改变抽提中所用的核抽提试剂(NER)的量而调整所需要的蛋白浓度而不会影响抽提效率。

从细胞中专一地抽提核蛋白是许多基因调节研究中成功的关键因素。然而目前大多数分离细胞核、制备核蛋白抽提物的方法需时很长并且需要机械匀浆、反复冻融、超速离心或者透析等步骤，而这些步骤很可能会影响到许多脆弱的核蛋白的完整性。NE-PER*试剂盒解决了这些问题，可以得到高质量浓缩的核蛋白抽提物，所得的抽提物可用于EMSA及其它分析技术。

 

产品特点：

利用Thermo Scientific NE-PER核蛋白-胞浆蛋白抽提试剂盒从多种哺乳动物细胞系中制备的胞浆组分和核组份的蛋白量。利用Thermo Scientific BCA微量蛋白定量分析试剂盒(产品货号 23235)进行蛋白定量。显示的数值为两次单独分离的平均值。

对HeLa细胞的胞浆及核组分进行蛋白免疫印迹分析，结果显示交叉污染少。利用4-20% 梯度Tris－甘氨酸变性凝胶对总蛋白量(20μg)相等的四种样品进行电泳。将蛋白转移到醋酸纤维素膜上，用含有3%BSA的Tris缓冲液进行封闭。A. 用抗Oct-1的抗血清(1:400)进行结合，然后利用1:100,000的标记辣根过氧化物酶的二抗进行结合。B. 用抗hsp90的抗血清(1:400)进行结合，然后利用1:50,000的标记辣根过氧化物酶的二抗进行结合。两个分析所用的底物均为用于蛋白免疫印迹的SuperSignal皮克级化学发光底物(产品货号 34080)。

 

参考文献

Corless,M.,et al.(2006).J. Endocrinol.190,719-727.

Gomes, D.A.,et al.(2008). J. Biol. Chem.2834344-4351.

Lecanda, J.,et al.(2007).Cancer Res.67, 1007-1018.

Liu, O.,et al. (2007). FASEB J. 21,61-73.

Smirnova, I.V.,et al. (2000).J. Biol. Chem.275(13), 9377-9384.

Yamada, N.A. and Farber, R.A. (2002).Cancer Research62, 6061-6064.

Yamada, N.A.et al. (2003).Mutagenesis18(3), 277-282.

 

订购信息：