1）洗涤不正确：
遗漏一步洗涤可能导致高背景。加入适当体积的洗涤液确保洗涤次数正确，确信正确的稀释洗涤液并且在孔内存留几秒。
2）底物被污染：
在使用之前确保底物没有金属离子污染和被氧化，底物本身是不带颜色的。
3）稀释剂污染：
大多数人的牛血清白蛋白残留检测试剂盒的稀释剂都是蛋白质基质，一开始可能污染稀释剂，应该用灭菌的移液管移出稀释剂。
4）底物暴漏于光下：
直接暴露于灯下，会使底物颜色表问深蓝色。
5）偶联物稀释不正确：
确保每一步都按照稀释指导手册进行，偶联物浓度太高可能会导致高背景。
6）孵育时间/温度不正确：
孵育时间/温度严格按照ELISA操作说明进行
7）ELISA板储存错误：
只用了一部分板，要确保剩余的一部分4℃ 储存。
