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人纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒应用方法

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详细介绍
产品名称: 人纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒
英文名称: Human Fibronectin (FN) ELISA Kit
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.22ng/mL
种属: 人
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清 和 其他生物液体

FN 简介
纤连蛋白(FN)是细胞外基质的一种高分子量(约500-600 kDa)糖蛋白,与称为整合素的跨膜受体蛋白结合。纤连蛋白还与其他细胞外基质蛋白结合,如胶原蛋白、纤维蛋白和硫酸肝素蛋白多糖。纤连蛋白以蛋白二聚体的形式存在,由两条几乎相同的多肽链组成,通过一对C端二硫键连接。每个纤连蛋白亚单位的氨基酸分子量为~230-~275 kDa,包含三种类型的模块:I型、II型和III型。所有这三种模块都是由两个反平行的β-片组成,形成一个Beta-三明治;然而,I型和II型是由链内二硫键稳定的,而III型模块不包含任何二硫键。III型模块中没有二硫键,这使得它们在受力时可以部分展开。

特异性
可检测样本中人的FN,且与其类似物无明显交叉反应。

典型数据及参考曲线
由于实验操作条件的不同( 如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度(ng/mL)     100     50     25     12.5     6.25     3.12     1.56     0
OD值     2.15     1.67     1.21     0.85     0.52     0.34     0.21     0.12
校正OD值     2.03     1.57     1.02     0.73     0.4     0.22     0.13     -

重复性
板内变异系数小于10%,板间变异系数小于10%

回收率
在选取的健康人 血清、血浆、细胞培养上清中加入3个不同浓度水平的人FN,计算回收率
样本类型     范围     平均回收率
血清(n=8)     84-101     96
血浆(n=8)     92-105     102
细胞培养上清(n=8)     96-108     105

线性稀释
分别在选取的4份健康人 血清、血浆、细胞培养上清中加入高浓度人FN,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
稀释比例     回收率(%)     血清     血浆     细胞培养上清
1:2     范围(%)     84-95     88-96     90-110
平均回收率(%)     91     93     96
1:4     范围(%)     89-103     87-108     105-115
平均回收率(%)     94     98     108

注:ELISA试剂盒检测范围等数据,因检测样本 的不同而调整,实际数据以随货说明书为准。
 
 
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