人I型前胶原肽PICP ELISA试剂盒说明书

人I型前胶原肽(C端)定量酶联检测试剂盒介绍

人I型前胶原肽(C端)定量酶联检测试剂盒【测定原理】
本试剂盒采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人PICP单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的人PICP与单抗结合，加入生物素化抗人PICP多抗，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的生物素抗体与之结合，加入酶底物TMB，出现蓝色，加终止液硫酸，颜色变黄，在450nm处测OD值，人PICP浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中人PICP浓度。

人I型前胶原肽(C端)定量酶联检测试剂盒【试剂盒组成】
1.酶标板：一块（96孔/48孔），已包被抗人PICP单抗。使用前倾去孔中液体，用洗涤液洗板1次，滤纸上拍干。剩余板条密封好，4oC保存（孔中保留保护液）。
2.样品稀释液：一瓶（5ml）
3.一抗体工作液：一瓶（5.5ml/2.7ml）
4.酶标抗体工作液：一瓶（10.5ml/5.5ml）
5.底物液：二瓶/一瓶（5.5ml）
6.终止液：一瓶（6ml/3ml）
7.洗涤液（20 x）：一瓶（50ml/25ml）
8.标准品（冻干粉，1000 ng/ml）：二管/一管
9.坐标纸：一张
10.封板纸：一张

人I型前胶原肽(C端)定量酶联检测试剂盒【样品的准备和保存】
样品如果不立即分析，应分装后冷冻保存，且避免反复冻融。
1.血清：用干净试管收集血液，室温凝固30分钟，离心1000×g 15分钟，收集血清。立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
2.血浆：采用EDTA抗凝，抽血后30分钟内离心1000×g 15分钟。立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
3.细胞培养、组织匀浆、体液：离心去除沉淀，立即分析或分装后-20℃冷冻保存。

人I型前胶原肽(C端)定量酶联检测试剂盒【试剂的准备】
1.标准品液配制：使用前每管中加入蒸馏水400ul溶解后即可。
2.洗涤液：用重蒸水1:20稀释

人I型前胶原肽(C端)定量酶联检测试剂盒【操作步骤】
1.实验前20分钟从冰箱中取出试剂盒，以平衡至室温（20-25℃）。
2.建立标准曲线：设标准孔8孔，每孔中各加入样品稀释液100ul，一孔加标准品100ul，混匀后用加样器吸出100ul，移至第二孔。如此反复作对倍稀释至第七孔，后，从第七孔中吸出100ul弃去，使之体积均为100ul。第八孔为空白对照。
3.加样：待测品孔中每孔各加入待测样品100ul。
4.将反应板置37℃120分钟。
5.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。
6.每孔中加入一抗体工作液50ul。
7.将反应板充分混匀后置37℃ 60分钟。
8.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。
9.每孔加酶标抗体工作液100ul。
10.将反应板置37 ℃60分钟。
11.洗板：同前。
12.每孔加入底物液100ul，置37℃暗处反应5-10分钟。
13.每孔加入50ul终止液混匀。
14.在450nm处测吸光值。（应尽快，时间过长可能导致本底偏高）

人I型前胶原肽(C端)定量酶联检测试剂盒【结果判断】
1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。
2.以标准品500、250、125、62.5、31.2、15.6、7.8、0 ng/ml之OD值在半对数纸上作图，画出标准曲线。将浓度作为X轴（对数轴），OD值作为Y轴（线性轴）。曲线应为一光滑曲线。
3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应人PICP含量。

人I型前胶原肽(C端)定量酶联检测试剂盒【注意事项】
1.以上标准孔及待查样品均建议做复孔，每次测定应同时制作标准曲线。
2.底物液使用前建议先行检查，若溶液颜色发蓝则已失效，弃去。
3.本试剂盒取出的试剂在室温条件下使用，溶液应轻轻摇匀后使用。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，这属于正常现象，加热使结晶完全溶解后再配制。
4.本试剂盒含2M硫酸，不要将它与含叠氮化钠的废物混在一起。
5.不同批号的试剂盒组份不能混用。
6.正确拿酶标板：不要接触板的底部，否则会影响读数。

人I型前胶原肽(C端)定量酶联检测试剂盒【有效期及贮存条件】
本试剂盒宜置2~8℃冷藏，可保存半年。试剂盒开封后请短期内做完。

人I型前胶原肽(C端)定量酶联检测试剂盒【性能参数】
灵敏度：zui小可测人PICP达4 ng/ml。
重复性：板内变异系数<10%。
板间变异系数<15%。

公司名称：北京科瑞美科技有限公司
电 话：010-56125083
手 机：15311648455
邮 箱：keruimeibio@126.com
网 址：www.craymeibio.com
QQ: 2743424804