RNase Inhibitor(RNase 抑制剂)使用说明书

货号：C6101

规格：5000U

产品组成及保存条件：

编号	规格	储存条件
C6101	5000U	-20°C，保质期24个月

 

浓度：40000U/ ml

产品简介：

RNase Inhibitor可与RNase 非共价结合，开成1:1的复合物，可以特异性抑制RNase A、RNase B、RNase C和人胎盘RNase，不抑制T1和RNase H活性，具有广谱的RNase抑制活性。对RNase1、RNaseT1、S1核酸酶，RNase H或来源于曲霉属的RNase无抑制作用。兼容性好；不影响M-MLV或AMV Reverse Transciptase、Taq DNA Polymerase、T3、T7或SP6 RNA Polymerase 活性，在较宽的pH范围内（pH 5-8)均可发挥作用。尿素及巯基类试剂可以解离本品与RNase 形成的复合物，使RNase复活而RNase Inhibitor 不可逆失活，因此反应体系中应避免尿素及巯基类试剂存在。

RNase抑制剂的分子量为50kDa,通过非共价键以1:1的比例与RNase结合而抑制其酶活，结果常数大于10¹⁴

产品应用：

1、RT-PCR；

2、cDNA 合成反应，提高多聚核糖体的产量和活性；

3、体外无细胞系统转录或翻译（Cell-free in vitro transcription or translation system)

4、酶催化的RNA标记反应；

5、对RNA的完整性要求高的其他应用。

产品来源：

来自猪的RNase抑制基因在大肠杆菌中表达和多步纯化精制而成。

活性定义：

一个活性单位（U）定义为：抑制5ng RNase A 的50%活性所需的RNase Inhibitor量。

活性测定是通过抑制RNaseA对胞嘧啶 2´,3´ -环单磷酸盐的水解来测定的。

酶储存液：

20mM HEPES-KOH，50mM KCI,8mM DTT,50%Glycerol, PH7.6@25℃

保存条件：

-20°C，有效期24个月。

使用说明：

使用RNase Inhibitor避免RNase污染方法：加入抑制剂，使反应终浓度达到1U/ul。再加入组分过程中，RNase抑制剂应在其他可能是RNase污染源的组分（如酶、微量质粒）之前加入。

注意事项：

1、RNase Inhibitor 是一种50kDa的蛋白质，在变性条件下会失活。

2、RNase Inhibitor 应在低于50℃的温度下使用。

3、本品抑制RNase活性的pH值范围较广，在pH7~8时表现zui大活性。

4、避免起泡剧烈搅拌、涡旋等操作，以防止本品失活。

 

附：RNA酶抑制剂各个实验反应量推荐：

1.RT PCR：推荐反应体系按照1U／ul；

2.cDNA合成：推荐反应体系按照0.5~1U／ul；

3.体外无细胞系统转录：推荐反应体系按照15~20U／ul；

4.SP6或T7RNA聚合酶的体外转录：推荐反应体系按照1U／ul；

5.多核糖体分离：推荐反应体系按照1U／ul；

6.体外翻译：推荐反应体系按照1U／ul；

7.酶催化的RNA标记反应：推荐反应体系按照1U／ul；

 上述所述实验给出的是推荐反应用量，具体的RNA酶抑制剂在各个实验反应中的zui佳用量需要具体实验具体分析，因为RNA酶抑制剂的具体定量与不同实验反应中的RNase含量和反应Buffer都有关联，所以，实验反应中的zui佳NRA酶抑制剂的用量建议还是要做一下预实验来确定。