【规格】:100ml
【分类】:免疫印迹
【保存】:4℃,避光,12个月
【用途】:免疫印迹检测中的发色底物显迹,尤其适用于碱性磷酸酶系统。
【检测原理】:用NBT氧化后,BCIP水解产生靛蓝沉淀物。
简介:
BCIP NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(BCIP/NBT?Alkaline?Phosphatase?Color?Development) 是一种用于免疫组化显色、Western等膜显色和诱导多功能干细胞iPS鉴定等的试剂盒。BCIP/NBT是碱性磷酸酯酶的常用底物,在碱性磷酸酯酶的催化下,BCIP会被水解产生强反, 该产物会和NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。
BCIP/NBT?Alkaline?Phosphatase?Color?Development̳可用于细胞或组织的碱性磷酸酯酶显色包括诱导多功能干细胞iPS的鉴定, 也可用于Western等结合有碱性磷酸酯酶的膜的显色检测\细胞或组织内源性的碱性磷酸酯酶显色。
使用方法:
1、对于组织切片或细胞样品或膜,在与碱性磷酸酯酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后,用适当洗涤液洗涤3～5次,每次3～5min。
2、对于检测内源性碱性磷酸酯酶的组织或细胞样品,在适当固定后,也用适当洗涤液洗3～5次,每次3～5min。
3、按照如下比例依次加入各溶液,混匀后即配制成BCIP/NBT染色工作液:
4、洗涤完毕后,去除洗涤液。
5、加入适量BCIP/NBT染色工作液,确保能充分覆盖样品。
5、室温避光孵育5～30min或geng长时间(可长达24小时),直至显色至预期深浅。
6、去除BCIP/NBT染色工作液,用蒸馏水洗涤1～2次即可终止显色反应。
7、对于组织切片或细胞样品,显色反应终止后,如有必要可以用中性红染色液(neutral& solution)染色,以便于观察。对于膜,显色反应终止后,可以室温晾干避光保存。
注意事项:
1、BCIP对人体有刺激性,NBT对人体有害,请注意适当防护。
2、操作过程中,尽量避免强光照射。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
