名称:ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)
产品规格:500ml/100ml
分类:细胞组分分离
储存条件:4℃,12个月
用途:复苏电转化或化学转化的感受态细胞,提高转化效率。
注意事项: 注意事项:无菌溶液。注意无菌操作,经过滤除菌处理。
主要成分:主要由NH4Cl组成,pH7.2。
使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床。
产品简介:
去除红细胞的方法有多种,Leagene生产的ACK红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer),也称为ACK Lysis Buffer,是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成分为氯化铵,ACK Lysis Buffer经过优化配方,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。
Leagene ACK Lysis Buffer对于裂解、去除有细胞核红细胞,例如鸟或禽类的红细胞,效果不佳,裂解类似细胞时,不建议采用。本裂解液经过滤除菌,经过ACK Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
自备材料:
1、 胰蛋白酶,亦可采购Leagene的胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%:0.02%)(CC0130)
2、 离心机
3、 PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液
操作步骤:
(一)组织细胞样本的常规操作
1、制备细胞悬液: 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制制备成细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解: 加入3~5倍细胞沉淀体积的ACK Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解1~2min。本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3、离心: 4℃,400~500g离心5min,弃红色上清。如无低温离心机本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤:根据具体实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。4℃,400~500g离心2~3min,弃上清,离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
6、如有必要,重复上述步骤5一次,共洗涤1~2次。
7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。






