操作步骤
1. 从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自
封袋密封放回 4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品 50μ
L；
3. 待测样本孔先加待测样本 10μL，再加样本稀释液 40μL；
4. 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记
的检测抗体 100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温
育 60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去
洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 5 次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。
7. 每孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的
OD 值。
