植物DNA提取试剂盒说明书
产品编号：BTN60602
规格：50T
产品及特点：
本产品是在植物DNA提取试剂盒基础上开发的柱式植物基因组DNA提取产品，可以用于多种植物基因组DNA（含叶绿体和线粒体DNA）的快速提取。
1. 纯度高，不含污染和抑制剂，可以直接用于酶切、PCR、real-time PCR、mμLtiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting, microsatellite analysis 等各种后续分子生物学实验。
2. 产率一般在3-30 μg/100 mg 样品。OD260/280 一般在1.8 以上。DNA 片段长度一般在40-50 Kb左右。
3. 适用范围广，可以使用于大多数植物的各种组织。
4. 不会发生离心柱堵塞现象。
规格及成分：
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成分 |
规格 |
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溶液A |
40ml |
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溶液B |
20ml |
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溶液C |
50ml |
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离心吸附柱 |
50套 |
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通用洗柱液 |
50ml |
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DNA洗脱液2.0 |
10ml |
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说明书 |
1份 |
保存条件：
常温运输和保存，有效期一年。
自备试剂：
氯fang。
使用方法：
注意：溶液A 和溶液B 容易产生沉淀，溶液B 比较粘稠，用前均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分摇匀。
1. 65℃预热柱式植物DNA提取试剂盒溶液A，待其沉淀溶化后，充分混匀，取0.75 mL加入到10 mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取植物组织0.1-0.5 g左右，剪成微小的碎片，加入到有溶液A 的10 mL塑料离心管中并短暂匀浆。也可以液氮研磨后将粉末加入到管中(建议不要在陶器或玻璃研钵中破碎细胞，因为二氧化硅会非特异地吸附DNA，降低DNA 回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。匀浆过程中将产生大量泡沫，属于正常现象。
3. 将匀浆液(包括植物碎片)全部转移到新的1.5 mL塑料离心管(此时匀浆液较为粘稠，可将枪头剪去一截后转移上清, 不能吸取的植物碎片可以小心倒入)。
4. 在匀浆液中加入0.5 倍体积预热的溶液B 到离心管中，颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。（由于溶液B 比较粘稠，可以将1 mL枪头剪去一截再吸取）。
5. 65℃水浴3-5分钟。如果室温放置，DNA 产量会降低10-20%。
6. 加入200 μL自备氯fang，震荡混匀10-30 秒，此时溶液将呈乳白色。
7. 12,000 rpm 室温离心2 分钟。此时上清液将变得透明，中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5 mL 塑料离心管中，避免触及中间层的白膜。
8. 加入1.5倍体积的溶液C，颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中，室温放置至少2分钟。
9. 12,000 rpm 室温离心1 分钟，DNA 将吸附在离心吸附柱的膜上，倒弃收集管中的穿透液。
10. 将0.5 mL通用洗柱液加入离心柱中，12,000 rpm 室温离心1 分钟，弃穿透液。
11. 重复上步操作一次。
12. 空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的1.5 mL 离心管中。
13. 将离心吸附柱放置在一新的1.5mL 塑料离心管中，加50-100μL DNA 洗脱液2.0，室温放置3-5 分钟。
14. 12,000 rpm 室温离心1分钟即得植物DNA 溶液。
15. 由于本产品使用的离心吸附柱吸附DNA 的能力较强，可以重复上步操作一次，以洗脱得到更多的DNA。
16. 直接取5-10μL 电泳检测DNA，其余放冰箱备用。
使用效果：
图注：用本产品提取0.1g牵牛花叶片基因组DNA，60μL洗脱液洗脱，取15μL检测。泳道3和4为本产品提取效果，泳道1和2为某公司同类产品提取效果。本公司提取的牵牛花叶片基因组DNA 条带清晰，产量高。M为本公司Marker，染料为本公司绿如蓝核酸染料（BTN70909）。
