BTN60306 柱式血液DNA提取试剂盒说明书

柱式血液DNA提取试剂盒说明书

产品编号：BTN60306

规格：50T/200T

产品及特点：

本产品是基于离心柱/硅胶膜原理的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括人和禽类)抗凝全血中提取基因组DNA的试剂。它具有下列特点：

1. DNA纯净，OD260/280在1.8-2.0之间。不含蛋白质和RNA污染，可直接用于PCR、酶切、杂交等。

2. 产量高，一般为1-10ug/mL全血(对哺乳动物血液)。

3. 操作简单，整个过程约20分钟，全室温操作，适合大规模样品处理。

4. 用量广泛， 每次可以处理少达20 μL（对禽类动物血液）， 多达1 mL的血液(对哺乳动物血液)。

5. 安全，本试剂盒对人体，无腐蚀性和刺激性气味。

规格及成分：

保存条件：

常温运输、4℃保存，有效期一年。

使用方法：

1. 在0.02-1 mL新鲜或抗凝血液（冷冻血需先37℃水浴融化）中加入0.5 mL红细胞裂解液（A型），吹打混匀。

a) 哺乳动物，血液使用量以300 μL以下为宜，使用量越大产量越高，但产率会降低。如果血液多于300 μL，重复1-2步两次可以提高产率。

b) 禽类动物，血液使用量以20 μL以下为宜，可以从第3步做起。

2. 室温12,000-15,000 rpm离心5分钟，沉淀呈粉红色，小心倾去上清。

3. 再短暂离心半分钟，吸弃残留的液体。此步有利于后面的细胞裂解，但一般可以省略。

4. 向有沉淀的离心管内加入0.5 mL溶液A（溶液A有少量晶体沉淀，用前需要摇晃均匀），用移液枪吹打使沉淀充分悬浮起来。此步目的是裂解细胞，释放DNA，所以吹打越充分越好。

5. 静置2分钟待溶液变清亮后，将液体转移到离心吸附柱中并静置2-5分钟，以使DNA与膜充分结合。

6. 12,000 rpm离心半分钟，DNA将吸附到膜上，弃收集管中的废液。

7. 加入0.7 mL的通用洗柱液，12,000 rpm离心半分钟，弃收集管中的废液。

8. 加入0.3 mL的通用洗柱液，12,000 rpm离心半分钟，弃收集管中的废液。

9. 12,000 rpm离心半分钟，甩干残留液体。此步很重要，以去除膜上残留通用洗柱液，否则会影响后续反应。

10. 将离心吸附柱置于一新的1.5 mL塑料离心管（自备）中，加入适量50 μL DNA洗脱液2.0，室温放置2分钟。如果将DNA洗脱液2.0在65℃预热后再使用，洗脱DNA的效果会更好。

11.12,000 rpm离心半分钟，离心管底溶液即DNA溶液。可以立即使用或放冰箱长期保存。