BTN60202 柱式DNA胶回收试剂盒说明书

柱式DNA胶回收试剂盒说明书

产品编号：BTN60202

规格：50T/100T

产品及特点：

本试剂盒用于从琼脂糖凝胶中或DNA反应体系中(如PCR反应)回收DNA片段。试剂盒采用可以、专一结合DNA的硅胶膜和独特的溶胶体系，或DNA反应体系中回收的DNA片段，回收效率可达50-90%（跟片段大小相关）。

1. ，回收效率zui高可达90%（跟片段大小和胶浓度等因素有关）。

2. 快速，整个过程只需要十余分钟。

3. 回收DNA的范围为50bp－40Kb（但效率各不相同）。

4. 纯度高，本试剂盒回收的DNA可直接用于酶切、连接、PCR登等多种分子生物学实验。

5. 用途广，本试剂盒能回收单链、双链及环状DNA。

6. 储存方便，试剂盒可以在室温放置数月，不影响其质量。

规格及成分：

保存条件：

常温运输及保存，有效期为一年。

使用方法：

1. 对胶回收：切取含DNA片段的琼脂糖凝胶（100 mg左右，尽可能多地把多余的胶切除，否则会影响回收效率），放入一干净的1.5 mL塑料离心管（自备）中，用移液枪头捣碎，按重量比为1：3到1：5的比例加入通用溶胶液(100mg琼脂糖凝胶需要加入300μL-500μL通用溶胶液)。

PCR回收：直接在PCR反应管中加3-5倍体积的通用溶胶液，混匀，然后跳过第2步、直接从第3步做起。如果PCR反应中使用了石蜡，需要预先去除。

2. 50℃保温使胶完全溶化（一般需要5分钟），其间可以振荡数次以促进琼脂糖凝胶的溶化。如果片段长度在300bp以下，建议不要加热，以免DNA变性，影响回收率。

3. 将离心管中的溶液转移到离心吸附柱中，套上液体收集管，静置3分钟。

注意：静置有助于DNA与离心吸附柱的硅胶膜结合。若一次加不完，可分两次加入并离心。

4. 12000-15000g离心1分钟，倒掉收集管中的液体。

5. 加入0.7-0.8 mL通用洗柱液于离心柱中，室温静置2分钟。

6. 12000-15000 g离心1分钟，倒弃收集管中的废液。

7. 12000-15000 g离心半分钟以去除离心柱中的残留液体。

8. 将离心柱置于一新的干净的塑料离心管（自备）中，加入30-100 μL DNA洗脱液2.0于离心吸附柱硅胶膜的中央，静置3分钟。

9. 12000-15000 g离心1分钟。

10. 离心管底部所得溶液即为纯化的DNA溶液，可立即用于后续实验或者放-20℃长期保存。

注意事项：

1. 电泳回收DNA时，电泳缓冲液可以为TAE、TBE或者DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2。回收效果为SuperBuffer-2zui好，TAE次之，TBEzui差。详细见SuperBuffer-2产品介绍。

2. 通用洗柱液含有容易挥发物质，使用后一定要拧紧瓶盖，密闭保存。

3. 琼脂糖凝胶体积的大小与回收率成反比关系，即体积越大，越不利于回收，一次胶回收以使用100 mg琼脂糖凝胶为宜。

4. 如果在五分钟内凝胶溶化不完全，可以适当的延长水浴时间以使胶充分溶化，否则DNA包裹在琼脂糖凝胶中，影响DNA的回收效率。

5. 胶溶化后的液体转移到离心柱后，可以延长静置时间使DNA与膜充分结合，提高回收效率。

6. 洗脱DNA前的空甩很重要，其目的是去除膜上残留酒精，否则残留酒精会影响后续DNA反应。

7. 增大DNA洗脱液2.0使用量有利于回收，但要注意实际上样量与zui终回收体积的关系，以便于计算回收率。DNA洗脱液2.0可以用TE或水替代，但回收率稍有降低。