一管式病毒DNA提取试剂盒说明书
产品编号:BTN3674
规格:50T/200T
产品及特点:
本产品是专门用于从血清(血浆)等液体样品中提取病毒(如HBV)DNA的产品,其原理是异硫氰酸胍/LiCl 溶液即能裂解病毒,又能沉淀DNA。本产品灵敏度高,稳定性好,使用简单快捷,尤其适合于整合到临床PCR 检测试剂盒中。
1. 回收率高,可以达到90%以上,高于大部分基于离心柱的提取方法。
2. 灵敏度高,通过PCR 检测到的zui终灵敏度可以达到30-50 拷贝/mL。
3. 一管式操作,不使用离心柱,整个操作过程均在室温下完成。
4. 安全,不需要使用苯酚和氯fang等有机溶液。
5. 处理量大,如果加上病毒离心富集步骤,zui多可以处理1.5 mL 液体病毒样品。
6. 与PCR 和荧光PCR 兼容。
规格及成分:
成分 |
50T |
200T |
病毒DNA提取试剂 |
30ml |
120ml |
说明书 |
1份 |
1份 |
保存条件:
常温运输及保存,有效期一年。
自备试剂:
异丙醇,70%乙醇。
使用方法:
1. 在1.5 mL 螺旋盖塑料离心管(zui好不要使用压盖式塑料离心管)中加入0.1-0.2 mL 液体样品。如果病毒需要富集,可以将1.5 mL 液体在4℃ 24,000g 冷冻离心60 分钟, 移弃1.3 mL 后继续操作。
2. 加入0.6 mL 病毒DNAOUT 溶液,振荡30 秒混匀后室温放置10 分钟。
3. 振荡30 秒混匀后加入0.7 mL 异丙醇,振荡30 秒混匀后,15,000 g 室温离心15 分钟。
4. 移弃上清,注意不要触及管底的DNA 沉淀,加入1.0 mL 70% 乙醇,振荡数秒后 15,000 g 室温离心5 分钟。
5. 移弃上清,注意不要触及管底的DNA 沉淀。再短暂离心数秒, 移弃残留上清(残留的乙醇会影响后续反应)。此时离心面的管壁上将有可见的膜状沉淀,加入200 μl 超纯水,用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁的膜状沉淀,使其溶解。溶解液混浊或有少量不溶物是正常现象,如果溶于200 uL 水而样品使用量不超过PCR 体系的1/2 时,不溶物一般不会影响后续PCR 反应。不要离心只取上清使用,因为不溶沉淀物中含有DNA,必须取混合液使用(哪怕很浑浊)。
6. 样品可以直接取适量用于PCR,也可保存于-20℃长期保存。
使用效果:
图注:用本产品和市场上某同类产品分别提取0.2 mL HBV 阳性血浆(含1000 拷贝/mL HBV),DNA 溶于200μl 水中,取5 μl进行荧光PCR( 使用MJResearch 的CHROMO4 荧光PCR 仪)。红和绿线表示本产品,蓝线表示市场上某同类产品。