植物DNA提取试剂盒说明书
产品编号：BTN3672
规格：100T/250T
产品及特点：
植物DNA提取试剂盒是根据经典的方法改良得到的专门用于提取新鲜或冷冻植物组织基因组DNA(包括叶绿体DNA和线粒体DNA)的试剂盒。
1. 操作快速， 整个过程在30 分钟内即可完成。
2. 纯度高，A260/A280 在1.9左右， 可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。提取得到的DNA 大小在30-50Kb 之间。
3. 产率高，高于大多数同类产品(尤其是基于离心柱的提取产品)。
4. 安全，本试剂盒对人体，无腐蚀性和刺激性气味。
规格及成分：
|
成分 |
规格 |
|
溶液A |
40ml |
|
溶液B |
20ml |
|
RNase A溶液(10mg/mL) |
0.75ml |
|
说明书 |
1份 |
保存条件：
常温运输及保存，RNase A 溶液4℃保存，有效期一年。
自备试剂：
氯fang、异丙醇、75%乙醇、TE。
使用方法：
注意：溶液A 和溶液B 容易产生沉淀，溶液B 比较粘稠，用前均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分摇匀。
1. 65℃预热溶液A，待其沉淀溶化后，充分混匀，取0.75 mL 加入到10-15mL 塑料离心管（常用于培养细菌用）中并放置于65℃待用。
2. 称取植物组织0.1-0.3g 左右，剪成微小的碎片，转移到装有溶液A 的离心管中短暂匀浆。匀浆过程中将产生大量泡沫，属于正常现象。也可以液氮研磨后将粉末加入到预热的溶液A中(建议不要在陶器或玻璃研钵中破碎细胞，因为其中的主要成分二氧化硅会非特异地吸附DNA，降低DNA 回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。
3. 将匀浆液(包括植物碎片)全部转移到新的1.5mL 塑料离心管中。注意：匀浆液较为粘稠，可将1 mL 枪头剪去一截后用于转移匀浆液，不能吸取的植物碎片可倒入。
4. 在匀浆液中加入0.5 倍体积 65℃预热的溶液B，颠倒数次混匀。由于溶液B 比较粘稠，可以将1 mL 枪头剪去一截再吸取。
5. 加入15 μL 的RNase A 溶液（10 mg/mL）。
6. 65℃放置3-5 分钟。如果室温放置，DNA 产量会降低10-20%。
7. 加入200 μL 自备氯fang，震荡器上充分震荡混匀30 秒。
8. 12000-15000 g 室温离心2 分钟，此时两相交界面将有白色膜状物，小心转移上清液到一个新的1.5 mL 塑料离心管中，避免触及中间层的白膜。
9. 加入1 倍体积(约750 μL)的自备的异丙醇到上清液中，盖紧盖子后用手上下颠倒30 秒混匀。此时一般将有絮状DNA 沉淀出现。
10. 12000-15000 g 室温离心3 分钟。此时管底将有微小DNA 沉淀，小心弃上清，注意不要丟弃DNA 沉淀。
11. 在离心管中加1 mL 75%乙醇，短暂震荡，12000-15000 g 室温离心3分钟，弃上清。
12. 重复上述操作一次。
13. 短暂离心，小心吸弃残留的液体（此步不要省略，否则残留的液体含乙醇将会影响DNA 电泳、酶切和PCR 等反应），室温晾干。
14. 加入50-100 μL 自备的TE 缓冲液充分溶解DNA 沉淀。直接取5-10 μL电泳检测DNA，其余放冰箱备用。
