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大鼠内皮素酶联免疫试剂盒

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  • 更新日期:2018-04-03 09:18
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详细介绍
大鼠内皮素酶联免疫试剂盒概述  
内皮素是一种由21个氨基酸组成的活性多肽,为目前已知缩血管活性强的物质。在生理状态下,由于内皮细胞合成内皮素很少且清除速度快,故血浆中内皮素浓度很低。 但在内皮细胞损伤、组织缺血缺氧等情况下,内皮细胞大量合成内皮素并释放入血,成为参与疾病病理生理过程的重要体液因素。 实验原理  本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中内皮素水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入内皮素、生物素化的抗大鼠内皮素抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的内皮素呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。 
预期应用  ELISA法定量测定大鼠血浆或其它相关液体中内皮素1(ET-1)含量。 
大鼠内皮素酶联免疫试剂盒试剂盒组成  
1. 酶联板:一块(96孔)  
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,其浓度为10000 pg/mL,做 系列倍比稀释后,分别稀释成10000 pg/mL,5000 pg/mL ,2500 pg/mL,1250 pg/mL,625 pg/mL,312 pg/mL,156 pg/mL,其原液直接作为zui高标准浓度,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/mL,临用前15分钟内配制。  如配制5000 pg/ml标准品:取0.5ml 10000 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。 5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。  
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A1:100稀释。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B1:100稀释。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。  
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。  
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。  
11.   标本的采集及保存  
1.血清:标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。  
2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。    
注:标本溶血会影响后大鼠内皮素酶联免疫试剂盒检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
 
 
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