人ELISA试剂盒实验过程必知小知识

人ELISA试剂盒实验过程必知小知识：
① 建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。
② 若显色过浅，可适当延长底物温育时。
③ 实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
④ 酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
⑤ 标本宜在新鲜时检测，如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应，保存过久可发生聚合在ELISA中可使本底加深。
⑥ 冻结标本溶解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠混合，不要在混匀器上强烈震荡。
⑦ 浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤，澄清后再检测。
⑧ 反复冻融会使蛋白效价降低，所以代测样本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。
样本处理的具体方法
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
大鼠蔗糖酶异麦芽糖酶(SI)ELISA试剂盒 ，英文名： SI ELISA Kit
大鼠粘胶蛋白/肌腱蛋白C(TN-C)ELISA试剂盒 ，英文名： TN-C ELISA Kit
大鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA试剂盒 ，英文名： MUC5B ELISA Kit
大鼠粘蛋白/粘液素C(MUCC)ELISA试剂盒 ，英文名： MUCC ELISA Kit
大鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)ELISA试剂盒 ，英文名： MUC1 ELISA Kit
大鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)ELISA试剂盒 ，英文名： REG-1a ELISA Kit
大鼠载脂蛋白H(Apo-H)ELISA试剂盒 ，英文名： Apo-H ELISA Kit
大鼠载脂蛋白E(Apo-E)ELISA试剂盒 ，英文名： Apo-E ELISA Kit
大鼠载脂蛋白C-II(APOC2)ELISA试剂盒 ，英文名： APOC2 ELISA Kit
大鼠载脂蛋白C-I(APOC1)ELISA试剂盒 ，英文名： APOC1 ELISA Kit
大鼠载脂蛋白B-48(ApoB48)ELISA试剂盒 ，英文名： ApoB48 ELISA Kit
大鼠载脂蛋白B48(Apo B48)ELISA试剂盒 ，英文名： Apo B48 ELISA Kit
大鼠载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒 ，英文名： apo-B100 ELISA Kit
大鼠载脂蛋白B100(Apo B100)ELISA试剂盒 ，英文名： Apo B100 ELISA Kit
大鼠载脂蛋白A5(apo-A5)ELISA试剂盒 ，英文名： apo-A5 ELISA Kit
大鼠载脂蛋白A1前体(Pre-Apo-A1)ELISA试剂盒 ，英文名： Pre-Apo-A1 ELISA Kit
大鼠载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒 ，英文名： apo-A1 ELISA Kit
大鼠孕酮受体(PROGR)ELISA试剂盒 ，英文名： PROGR ELISA Kit
大鼠孕酮受体(PGR)ELISA试剂盒 ，英文名： PGR ELISA Kit
大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒 ，英文名： PROG ELISA Kit
大鼠诱导型一氧化合成酶(iNOS)ELISA试剂盒 ，英文名： iNOS ELISA Kit
大鼠诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒 ，英文名： iNOS ELISA Kit
大鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒 ，英文名： FFA ELISA Kit
大鼠游离原卟啉(FEP)ELISA试剂盒 ，英文名： FEP ELISA Kit
大鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒 ，英文名： Free-T3 ELISA Kit