a)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,每个标准品和空白孔建议做复孔,每个样品根据自己的数量来定,标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
b)将所有试剂盒充分混匀,不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
c)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干,重复此操作3次,如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
d)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内,立即加入50ul的生物素标记的抗体,盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
e)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
f)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
g)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟,避免光照。
h)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干,重复此操作3次,如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
i)在450nm波长处测定各孔的OD值。
实验标本采集必修课:
A、不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
B、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
C、血清:使用不含热原的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
D、细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
E、血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟取上清。
F、组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎,3000转离心10分钟取上清。
G、如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
Porcine adiponectin,ADP ELISA试剂盒 猪脂联素(ADP)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T
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Porcine D-Dimer,D2D ELISA试剂盒 猪D二聚体(D2D)ELISA试剂盒 规格: 96T/48T





