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大鼠Ⅰ型胶原(COL1)ELISA试剂盒实验流程

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  • 更新日期:2017-12-29 16:46
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详细介绍
大鼠Ⅰ型胶原(COL1)ELISA试剂盒实验流程:
1、将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体,洗涤除去未结合的抗体及杂质。
2、加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时问,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。
3、加酶标抗体:使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。
4、加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物,根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。
试验18条通用规矩:
1、要确保移液枪的性,差错不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但有专业人员进行纠正。
2、要装备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。汲取不同的液体后,要更换枪头。即使是汲取规范品时。
3、要在试验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都康复到室温,以使成果更安稳。
4、试验时,要使底物避光保存。
5、用枪汲取液体时速度不能太快,防止发生气泡而使汲取量不。
6、汲取液体时,要用量程和需要量挨近的枪去吸,削减差错。
7、将液体加到酶标孔中时,防止枪头和孔内液体触摸,可使枪头上的液滴和孔壁触摸,液滴会天然流下去。
8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行悄悄晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功用。
9、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸腾。
10、洗板时,每次洗液参加后,应静置1分钟,使清洗更加完全。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
11、洗液不行时,可用蒸馏水自行制造PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,参加0.1%的吐温20作为洗液。参加1/1000的叠氮钠后可长时刻保存。
12、底物是光灵敏的,要在临用前现配。
13、检测前,要翻开酶标仪,使之安稳10分钟以上。
14、底物有必定的毒性,停止液对皮肤有腐蚀性,应尽量防止触摸。
15、待检样品要弄清,否则会影响成果。
16、温浴时刻应恪守试剂盒规则。
17、应尽量做双孔试验,这样才能确保数据的性。
18、对成果有疑问的样品要用其它办法进行确证。
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