人的ELISA试剂盒实验详解

人的ELISA试剂盒实验详解
1.油镜的原理 使用油镜时需在玻片上滴加香柏油。由于从标本玻片上透过的光线，因介质密度不同，部分光线发生折射散失，使射入物镜光线减少（高倍镜孔径较大，影响不显著），因油镜的孔径较小，进入的光线则不够，致使物象显现不清。当在油镜与标本片之间加香柏油后，香柏油折射率（n=1.515）和玻璃的折射率（n=1.52）,因此可增加进入透镜的光线，使视野亮度加强。
2. 在油镜头上常有下列几种标记：①放大倍数是90×或100/；若镜筒的长度不变，显微镜的放大倍数=目镜倍数乘以物镜的倍数。②镜头下缘有一白色线圈或黑色线圈；③刻有
“油"或外文“HI"、“Oel"、“Oil"等字样。④油镜头的长度大于低倍镜和高倍镜。
3. 使用方法
① 对光 转动转换器，将低倍镜镜头（4 倍、10 倍）转至载物台中央透光孔位置，打开透光光阑，对光，直至目镜中出现光线明亮、均匀的视场为止。显微镜的光源可分为内置光源和外置照明。内置光源：接通电源，按下底座的开关，电源打开即可。外置光源：将光圈放到zui大位置，在用眼睛观察目镜的同时，转动反光镜使其朝向光源（自然光或灯光），使视野中的光线明、均匀。如靠近光源，可用平面反光镜，如距光源较远，可用凹面反光镜。根据所观察的标本，升降集光器和缩放光圈，以获光度。一般染色标本用油镜检查时，光度宜强，可将光圈开足，集光器上升至与载物台相平；检查未染色标本用低倍镜或高
倍镜观察时，应适当缩小光圈，下降集光器，使光度减弱。
② 装片 将标本片放置在工作台的夹持器中，用夹持起移动标本片至工作台开口中心（透光孔处）。
③ 调节焦距 通过旋转粗调焦手轮，将载物台升到zui高限定位置（制片不能触到物镜），此时已准备好调焦。使用4 倍或10 倍物镜，在目视目镜的同时，旋转粗调手轮，使工作台缓慢下降，在目视目镜中观察到的清晰的图像时，再调节光阑聚光镜孔，选择与物镜相匹配的孔，调节微调焦手轮，使视野中的图像清晰。用低倍镜找出标本的范围，然后提高镜筒，在标本的待检部位加一小滴香柏油，慢慢将油镜头浸于油中，但勿接触玻片。然后，自目镜处一面观察，一面微转动粗调节器，使镜筒徐徐上升，待看到模糊物象时，改用细调节器调至物象清晰。如果是滴片标本，先滴一滴标本在玻片上，轻轻盖上盖玻片。加盖玻片时，先将盖玻片的一边与在玻片上的水滴边缘接触，然后自一侧轻轻放下，先在低倍镜下观察，然后在高倍镜下观察，通过改变光圈的大小或转动细调焦手轮。
④ 还镜 观察完毕把镜头和载玻片上的油用3%擦净。将低倍镜转成八字型.降下聚光器, 转动粗调节器,使镜台下移,以免接物镜与集光器相碰受损。罩上镜套，放回原处。
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