维生素elisa检测试剂盒实验过程必知小知识

维生素elisa检测试剂盒实验过程必知小知识：
① 建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。
② 若显色过浅，可适当延长底物温育时。
③ 实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
④ 酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
⑤ 标本宜在新鲜时检测，如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应，保存过久可发生聚合在ELISA中可使本底加深。
⑥ 冻结标本溶解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠混合，不要在混匀器上强烈震荡。
⑦ 浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤，澄清后再检测。
⑧ 反复冻融会使蛋白效价降低，所以代测样本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。
基本信息
单胺氧化酶（MAO）为反映肝纤维化的酶，可分为两类。一类存在于肝、肾等组织的线粒体中，以FAD为辅酶，参与儿茶酚胺的分解代谢。另一类存在于结缔组织，是一种细胞外酶，无FAD而含有磷酸吡哆醛，只对伯胺起作用。血清中MAO和结缔组织中的MAO性质相似，能促进结缔组织的成熟，在胶原形成过程中，参与胶原成熟的后阶段架桥形成，使胶原和弹性硬蛋白结合。
注意事项
1、对苄胺偶氮β-萘酚不易溶解，需在热水浴中逐步洗取其色素，直至只剩黑色不溶物质。
2、对将苄醛化合物充分抽提到环己烷中，须置37℃水浴中30min，并搅拌2次。
3、苄醛化合物环己烷抽提液的吸收峰为480nm，为减少血清中胆红素的干扰，用500nm波长。
4、环己烷与水不互溶，比色前须用无水乙醇洗比色杯，使其干燥后再比色。
单胺氧化化酶主要作用于-CH-NH2基团，在氧参与下，催化一种单胺氧化，生成相应的醛、氨和过氧化化氢。以苄醛偶氮-β-萘酚为底物，在O2和H2O参与下，MAO催化生成苄醛偶氮-β-萘酚（氨及过氧化化氢），用环己烷抽提后直接比色测定。
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