免疫球蛋白elisa检测试剂盒操作方法
1、直接法免疫血清的制备
取体重2~3Kg的雄鸡1只,免疫前采血8~10mL,测其正常抗体。静脉注射新城疫弱毒新鲜尿囊液病毒2mL,同时腹腔注射8mL,2~4d后同法再免疫一次。第二次免疫后七天试血,血清凝集价在1︰320以上为合格即可全采血;如果不合格,可在第二次免疫后10d左右,用同法再免疫一次,一般都可获得价的免疫血清。制备抗病血血清时。抗原量要大,间隔日期要短。
2、免疫球蛋白抗血清制备方法
此法用于制备间接法抗抗体。因抗原为可溶性,故多需加佐剂。
(1)淋巴结注射法
1)选择体重2~3Kg的健康雄性家兔( 2只以上),编号;
2)在家兔两后脚掌共注射活卡介苗,50mg(约0.6mL.每只足庶部皮下0.1mL,皮内0.2mL)。7~10d后,鼠或国窝处淋巴结肿大如黄豆或蚕豆大小;
3)用二指固定肿大之淋巴结,两侧淋巴结各注射加有完全佐剂的抗原o.5mL,共1mL。事先将抗原稀释为 5~10mg/ml,在免疫前一日加入青、链霉素,使青、链霉素的浓度分别为1000U/mL和1000mg/mL。4℃过夜,次日取出与佐剂混合成乳剂。许多单位用两个注射器分别吸取佐剂与抗原,中间用细胶管连接,相互推进若干次,达到乳化目的;
4)10~14d后,于两侧淋巴结各注射加有完全佐剂的抗原0.25~0.5mL(这一次也可以省略);
5)7d后,于两侧淋巴结各注射加有不完全佐剂的抗原0.25~0.5mL;
6)试血:第三次免疫后7~10d,耳静脉取少量血,分离血清,用双扩散法,中间孔加抗原(1mg/mL),周围孔加不同稀释度的待检抗血清,37℃、 24h,观察结果,效价在1︰16以上,或者中间孔加抗血清,周围孔加不同稀释倍数的抗原。效价达4000倍以上即可应用;
7)放血:效价合格后即可放血。放血前停食12h。动物仰卧固定,颈部剪毛消毒,切开皮肤lOcm,找到颈动脉,将颈动脉和迷走神经剥离。选择血管中段,用两止血钳夹住(约 5cm),切开,放血(2500g重家兔可放血lOOmL);
8)分离血清:血液放于大试管、平皿或三角瓶中,凝固后,用铂耳或无菌滴管沿边缘剥离,先故37122h,再放4℃过夜,使血清充分析出。离心沉淀,鉴定合格,冰箱保存备用。
Dicer酶1(DICER1)ELISA试剂盒 ,英文名: DICER1 ELISA Kit
Diaphanous同源物1(DIAPH1)ELISA试剂盒 ,英文名: DIAPH1 ELISA Kit
Desmuslin蛋白(DMN)ELISA试剂盒 ,英文名: DMN ELISA Kit
Dermokine蛋白(DMKN)ELISA试剂盒 ,英文名: DMKN ELISA Kit
Derlin3蛋白(DERL3)ELISA试剂盒 ,英文名: DERL3 ELISA Kit
Derlin2蛋白(DERL2)ELISA试剂盒 ,英文名: DERL2 ELISA Kit
Derlin1蛋白(DERL1)ELISA试剂盒 ,英文名: DERL1 ELISA Kit
Dendrin蛋白(DDN)ELISA试剂盒 ,英文名: DDN ELISA Kit
DEK癌基因(DEK)ELISA试剂盒 ,英文名: DEK ELISA Kit
DEAD框肽5(DDX5)ELISA试剂盒 ,英文名: DDX5 ELISA Kit
dCMP脱氨酶(DCTD)ELISA试剂盒 ,英文名: DCTD ELISA Kit
Dachsous2蛋白(DCHS2)ELISA试剂盒 ,英文名: DCHS2 ELISA Kit
Dachsous1蛋白(DCHS1)ELISA试剂盒 ,英文名: DCHS1 ELISA Kit
D2-羟基戊二酸二乙酯脱氢酶(D2HGDH)ELISA试剂盒 ,英文名: D2HGDH ELISA Kit
C组着色性干皮病偶联因子(XPC)ELISA试剂盒 ,英文名: XPC ELISA Kit
C-型凝集素域家族4成员K(CLEC4K)ELISA试剂盒 ,英文名: CLEC4K ELISA Kit
C-型凝集素域家族3成员B(CLEC3B)ELISA试剂盒 ,英文名: CLEC3B ELISA Kit
C-型凝集素域家族2成员C(CLEC2C)ELISA试剂盒 ,英文名: CLEC2C ELISA Kit
C-型凝集素域家族11成员A(CLEC11A)ELISA试剂盒 ,英文名: CLEC11A ELISA Kit
C-型钠尿肽(CNP)ELISA试剂盒 ,英文名: CNP ELISA Kit
C-肽(C-Peptide)ELISA试剂盒 ,英文名: C-Peptide ELISA Kit
CytospinB蛋白(CYTSB)ELISA试剂盒 ,英文名: CYTSB ELISA Kit
CytospinA蛋白(CYTSA)ELISA试剂盒 ,英文名: CYTSA ELISA Kit
Cystin1蛋白(CYS1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYS1 ELISA Kit
Cylindromatosis蛋白(CYLD)ELISA试剂盒 ,英文名: CYLD ELISA Kit
Cylicin2蛋白(CYLC2)ELISA试剂盒 ,英文名: CYLC2 ELISA Kit
Cylicin1蛋白(CYLC1)ELISA试剂盒 ,英文名: CYLC1 ELISA Kit
Cupidin蛋白(CPD)ELISA试剂盒 ,英文名: CPD ELISA Kit
Cullin9蛋白(CUL9)ELISA试剂盒 ,英文名: CUL9 ELISA Kit
Cullin7蛋白(CUL7)ELISA试剂盒 ,英文名: CUL7 ELISA Kit
Cullin5蛋白(CUL5)ELISA试剂盒 ,英文名: CUL5 ELISA Kit
Cullin4B蛋白(CUL4B)ELISA试剂盒 ,英文名: CUL4B ELISA Kit
Cullin4A蛋白(CUL4A)ELISA试剂盒 ,英文名: CUL4A ELISA Kit
Cullin3蛋白(CUL3)ELISA试剂盒 ,英文名: CUL3 ELISA Kit
Cullin2蛋白(CUL2)ELISA试剂盒 ,英文名: CUL2 ELISA Kit
Cullin1蛋白(CUL1)ELISA试剂盒 ,英文名: CUL1 ELISA Kit