1.操作步骤
(1)细胞染色前,准备3种贮存液:①NBT:用10ml 70%DMF溶解0.5gNBT;②BCIP:用10ml 100%DMF溶解0.5g BCIP[二钠盐儿③碱性磷酸酶缓冲液:100mmol/LNaCl,5mmol/LMgCl2,100mmol/LTris(pH 9.5)。所有的贮存液置4C可保存1年。
(2)实验前,底物液新鲜配制。加66/ul NBT贮存液至10ml碱性磷酸酶缓冲液中,充分混合,加33ul BCIP贮存液,在1h内使用。
(3)将洗涤过的标本片放在一个适当的容器内。加足够量的底物液覆盖标本片(3~5ml适合于100mm平皿)。在室温中进行反应直到染色达到适当黑色。对一些试剂可在显微镜下定期监测。一般孵育时间大约是30min。
(4)在含有20mmol/LEDTA的PBS中漂洗以终止反应,螯合Mg2+。
(5)优化:如果需要,进行复染。
(6)用水冲洗,DPX封片。
2.需要的溶液和特殊设备
碱性磷酸酶缓冲液:100retool/L NaCl,5mmol/L MgCl2,100mmol/L Tris(pH9.5);
NBT溶液(0.5gNBT用10ml 70%DMF溶解,贮存在4C);
BCIP溶液(0.5gBCIP[二钠盐]用10m1100%DMF溶解,贮存在413);
20mmol/LEDTA用PBS溶解,DPX。
人细胞膜DNA抗体(cmDNA)免疫试剂盒 Human anti-cell membrane DNA antibody,cmDNA ELISA Kit
人细胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)免疫试剂盒 Human cytokeratin fragment antigen 21-1,CYFRA21-1 ELISA Kit
人细胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)免疫试剂盒 Human Cytokeratin 18-M65,CK 18-M65 ELISA kit
人细胞角蛋白18-M30(CK 18-M30)免疫试剂盒 Human Cytokeratin 18-M30,CK 18-M30 ELISA kit
人细胞角蛋白18(CK-18)免疫试剂盒 Human CK-18 ELISA Kit
人细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫试剂盒 Human ICAM-3 ELISA Kit
人细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)免疫试剂盒 Human ICAM-2 ELISA Kit
人细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)免疫试剂盒 Human ICAM-1 ELISA Kit
人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4/CD152)免疫试剂盒 Human CTLA-4 ELISA Kit
人细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体(IgG)免疫试剂盒 Human cytotoxin-associated protein(CagA)antibody(IgG)ELISA kit
人细胞毒素相关蛋白A(CagA)免疫试剂盒 Human Cytotoxin-associated protein,CagA ELISA Kit
人细胞凋亡相关斑点样蛋白(PYCARD)免疫试剂盒 Human PYCARD ELISA Kit
人硒结合蛋白1(SELENBP1)免疫试剂盒 Human SELENBP1 ELISA Kit
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人戊型肝炎病毒抗体(IgG)免疫试剂盒 Human Hepatitis E virus antibody IgG ELISA Kit
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人舞蹈病蛋白相互作用蛋白1(HIP1)免疫试剂盒 Human huntingtin interacting protein 1,HIP1 ELISA Kit
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人无花果酶2(FCN2)免疫试剂盒 Human FCN2 ELISA Kit
人乌头酸酶2(ACO-2)免疫试剂盒 Human aco
人蜗牛同源物2(SNAI2)免疫试剂盒 human snail homolog 2,SNAI2 ELISA Kit
人蜗牛同源物1(果蝇)样1蛋白(SNAIL1)免疫试剂盒 Human snail homolog1(Drosophila)-like 1 protein(SNAIL1)ELISA kit
人胃粘膜相关淋巴样组织淋巴瘤抗体(MALT Lymphoma Ab)免疫试剂盒 Human Mucosa-associated Lymphoid Tissue Lymphoma Antibody(MALT Lymphoma Ab)ELISA Kit
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