大鼠elisa试剂盒实验内标法的操作:
① 将已知量的内标样加入标准样品,制成混合标样,并配制一系列的已知浓度的工作标样。混合标样中标样与内标样的摩尔比不变。
② 注入色谱柱,以(标样峰面积/内标样峰面积)为响应值。
③ 根据响应值与工作标样浓度之间存在的线性关系,即W=f×A,制成标准曲线。
④ 将已知量的内标样加入未知样品,注入色谱柱,得到欲测组分的响应值。
⑤ 根据已知的系数f,即可求出欲测组分的浓度。
注意事项
1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2. 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
人趋化因子受体3(CCR3)ELISA Kit 名称: Human CCR3 ELISA Kit
人趋化因子配体17(CXCL17)ELISA Kit 名称: Human chemokine (C-X-C motif) ligand 17 (CXCL17) ELISA kit
人趋化因子26(CCL26)ELISA Kit 名称: Human C-C motif chemokine 26,CCL26 ELISA kit
人趋化因子2(CXCL2)ELISA Kit 名称: Human C-X-C motif chemokine 2,CXCL2 ELISA kit
人趋化因子(FK)ELISA Kit 名称: Human Fractalkine,FK ELISA Kit
人驱动蛋白家族成员27(KIF27)ELISA Kit 名称: Human KIF27 ELISA Kit
人清道夫受体类B成员1(SCARB1)ELISA Kit 名称: Human SCARB1 ELISA Kit
人轻链铁蛋白(L-ferritin)ELISA Kit 名称: Human L-ferritin ELISA Kit
人青少年2型血色素沉着症/幼年型血色病相关蛋白2(HFE2)ELISA Kit 名称: human HFE2 LISA Kit
人亲环蛋白A(PPIA/CYPA)ELISA Kit 名称: Human cyclophilin A,PPIA/CYPA ELISA Kit
人鞘脂激活蛋白原(PSAP)ELISA Kit 名称: human prosaposin,PSAP Elisa kit
人鞘磷脂(SM)ELISA Kit 名称: Human sphingomyelin,SM ELISA Kit
人鞘氨醇激酶1(SPK1)ELISA Kit 名称: Human Sphingosine kinase 1,SPK1 ELISA Kit
人鞘氨醇(SPH)ELISA Kit 名称: Human Sphingosine,SPH Elisa Kit
人桥粒芯糖蛋白3抗体(IgG)ELISA Kit 名称: Human desmogleins 3 antibody IgG ELISA Kit
人桥粒芯糖蛋白2(DSG2)ELISA Kit 名称: Human Desmoglein 2,DSG2 ELISA Kit
人桥粒芯糖蛋白1抗体(IgG)ELISA Kit 名称: Human desmogleins 1 antibody IgG ELISA Kit
人桥粒糖蛋白2(DSC2)ELISA Kit 名称: Human desmocollin-2/desmosomal glycoprotein II,DSC2 ELISA Kit
人羟赖氨酸糖苷(HOLG)ELISA Kit 名称: Human hydroxylysine glycosides,HOLG ELISA kit
人羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoAR)ELISA Kit 名称: Human Hydroxymethylglutaryl CoA Reductase,HMG-CoAR ELISA kit
人羟甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-CoA)ELISA Kit 名称: Human Hydroxymethylglutaryl CoA,HMG-CoA ELISA kit
人羟基赖正己氨酸(HLNL)ELISA Kit 名称: Human hydroxylysinonorleucine,HLNL ELISA Kit
人潜伏转化生长因子β结合蛋白2(LTBP2)ELISA Kit 名称: Human LTBP2 ELISA Kit
人前纤维蛋白1抗体ELISA Kit 名称: Human anti-Profilin 1 antibody ELISA Kit
人前纤维蛋白1ELISA Kit 名称: Human Profilin 1 ELISA Kit
人前铁调素(Pro-Hepc)ELISA Kit 名称: Human Pro-Hepcidin,Pro-Hepc ELISA Kit