KFS154 细胞质绿色荧光染料说明书

细胞质绿色荧光染料 CFDA, SE

Cat number：KFS154

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For Research Use only

一、试剂盒说明

CFDA SE 的全称为Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester，分子式为C29H19NO11，分子量为557.47。CFDA SE可以通透细胞膜，进入细胞后可以被细胞内的酯酶(esterase)催化分解成CFSE，CFSE可以偶发性地(spontaneously)并不可逆地和细胞内蛋白的Lysine残基或其它氨基发生结合反应，并标记这些蛋白。在加入荧光探针CFDA SE后大约24小时，即可充分标记细胞。被CFDA SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定，稳定标记的时间可达数个月。CFSE标记细胞的荧光非常均一，比以前使用的其它细胞示踪荧光探针例如PKH26的荧光更加均一，并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均匀。

由于CFDA SE标记细胞的荧光非常均匀和稳定，每分裂一次子代细胞的荧光会减弱一半，这样通过流式细胞仪检测就可以检测出没有分裂的细胞，分裂一次的细胞(1/2的荧光强度)，分离两次的细胞(1/4的荧光强度)，分裂三次的细胞(1/8的荧光强度)以及类似的其它分裂次数的细胞。

CFDA SE标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。常用于淋巴细胞的增殖检测，也可以用于成纤维细胞、NK细胞等其它细胞的增殖检测，甚至还可以用于细菌增殖的检测。

二、试剂盒组份

三、试剂盒以外自备仪器和试剂

流式细胞仪或荧光显微镜、低速离心机、微量移液器、载玻片、盖玻片(荧光显微镜观察需用)

四、注意事项

1. CFDA SE配制成储存液后宜在一个月内使用完毕，长不宜超过2个月。CFDA SE易被

水解，在水溶液中会很快变质。请在使用过程中避免接触水。在标记细胞的过程中和水接

触是在许可的范围内的。

2. CFDA SE溶剂在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖

内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。

3. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

五、操作方法

1. 制备标记储液：可用储液浓度为1~5mM。

2. 标记和检测：推荐短期标记工作液浓度：0.1μM。推荐1~2天时长的示踪标记，工作液浓  

度为：1~5μM。具体浓度针对不同细胞类型建议适当优化。

注意：标记的细胞呈绿色荧光，检测时的激发波长可以选择 488nm，此时的发射波长为 518nm，使用流式细胞仪检测时可以采用 FL1 detection channel