KFS123 内质网绿色荧光探针说明书

内质网绿色荧光探针 ER-Green[DiOC6(3)]

Cat number：KFS123

Store at -20℃ for 12 months，避光

For Research Use only

一、产品描述

内质网绿色荧光探针 DiOC6(3)，是一种膜可透性，绿色荧光，低浓度下可选择性染色活细胞的线粒体的亲脂性染料。高浓度下，也可以用于染色其他细胞器内膜，如内质网。DiOC6(3) （ex,480 nm; em,>520nm）。

二、产品包装

三、辅助说明

化学名称：DiOC6(3)

分子式：C29H37IN2O2

分子量：572.5

CAS 号码：53213-82-4

四、操作说明

制备 ER-Green 储液：10mg ER-Green 以无水 DMSO 制备成 1mM 的 ER 储液，-20℃避光保存。

 1. ER-Green 工作液的配制：

a. 取少量 ER-Green，以 HBSS 或不含酚红血清的合适培养基，按照 1:1000 比例进行稀释。

b. ER-Green 工作液使用前需 37℃预温育。

注：工作液中 ER-Green 的浓度可以根据实际情况进行适当调整，推荐的稀释比例调整范围为

1:1000-1:3000。为降低背景，在染色效果可以接受的范围内，建议尽量使用较低浓度的 ER- Red。

2. 内质网的荧光标记：

a. 去除细胞培养液，用适量的溶液如 HBSS with Ca2+ & Mg2+ (Hanks’ Balanced Salt Solution with Ca2+ & Mg2+)洗涤生长在盖玻片上的细胞。 对于悬浮细胞的染色可以参考贴壁细胞的染色方法进行。

b. 去除洗涤液，加入步骤 1 配制好的并 37℃预温育的 ER-Green 染色工作液，与细胞 37℃共孵育 15-30 分钟。

c. 去除 ER- Green 染色工作液，用细胞培养液洗涤细胞 1-2 次。

d. 随后通常用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜进行观察。此时可观察到内质网呈明亮的强荧光染色。

e. 如需固定，可以使用 4%甲醛 37℃固定 2 分钟。固定后用适当的洗涤液洗涤 2-3 次，每次 5 分钟，随 

后可以进行复染或滴加适当的抗荧光淬灭封片液，后封片观察。注意：ER-Green 染色的细胞不能用 Triton X-100 通透，Triton X-100 通透处理会导致ER-Green 的荧光染色消失。

五、注意事项

1． 储液 ER-Green (1mM)在 4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内， 可 20-

25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。对于微量的液体，每次使用前先离心数秒钟，使液体充分沉降到管底。

2．荧光染料可能发生淬灭，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

3．需自备盖玻片和载玻片。

4．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。