苏木素-伊红（H-E）染液说明书
Cat number：KFS119
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For Research Use o
一．试剂盒说明
苏木素—伊红染液（HE）染液主要用于显示各种组织正常成分及病变的一般形态结构，是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的基本的常规染色方法。在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值。
细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料（苏木素）的亲和力较强，而细胞浆则相反，它含有碱性物质与酸性染料（伊红）的亲和力较大。因此，组织切片经 HE 染色后，细胞核被苏木素染成蓝色，细胞浆，肌纤维、胶元纤维等染成不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。
二．试剂盒组份
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试剂编号 |
试剂组成 |
小包装 |
中包装 |
大包装 |
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试剂一 |
核染液 |
25ml×1 瓶 |
50ml×1 瓶 |
250ml×1 瓶 |
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试剂二 |
浆染液 |
25ml×1 瓶 |
50ml×1 瓶 |
250ml×1 瓶 |
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试剂三 |
增色液 |
25ml×2 瓶 |
50ml×2 瓶 |
250ml×2 瓶 |
分色液（需要者送，一、二、三种染色方法均不需要，只有第四种染色方法要用）储存条件及有效期：本试剂盒应置室温密闭保存，有效期一年。
所需仪器：光学显微镜、染缸、玻片、滴管、秒表、记号笔等。
三．操作方法
1. 一种染色法
① 染色之前用蒸馏水润湿已脱蜡并已梯度入水的组织 1-2 分钟，甩掉水分，但要确保蒸馏水润湿整个组织，并均匀分布；
② 试剂一核染液染色 5 分钟左右，水洗 3-5 秒；
③ 试剂二浆染液染色 10-30 秒，用试剂三增色液冲洗 1-2 次，滤纸吸干或自然晾干；此法可立即封片镜检
2.第二种染色法
① 染色之前用蒸馏水润湿已脱蜡并已梯度入水的组织 1-2 分钟，甩掉水分，但要确保蒸馏水润湿整个组织，并均匀分布。
② 试剂一核染液染色 5 分钟左右，水洗 3-5 秒
③ 试剂二浆染液染色 10-30 秒，在水中蘸 1-2 次，滤纸吸干或自然晾干；此法在玻片干后需无水乙醇脱水 2 次后再封片镜检。
3.第三种染色法
① 染色之前用蒸馏水润湿已脱蜡并已梯度入水的组织 1-2 分钟，甩掉水分，但要确保蒸馏水润湿整个组织，并均匀分布。
② 试剂一核染液染色 5 分钟左右，水洗 3-5 秒
③ 试剂二浆染液染色 2 分钟，在水洗 1-2 分钟，滤纸吸干或自然晾干；此法在玻片干后需无水乙醇脱水 2 次后再封片镜检。
4.第四种染色法
① 染色之前用蒸馏水润湿已脱蜡并已梯度入水的组织 1-2 分钟，甩掉水分，但要确保蒸馏水润湿整个组织，并均匀分布。
② 试剂一核染液染色 5 分钟左右，水洗 3-5 秒，分色剂中蘸 2 下，水冲；
③ 试剂二浆染液染色 2 分钟，直接梯度脱水（30%、70%、95%、无水乙醇、无水乙醇），滤纸吸干或自然晾干；此法可立即封片镜检
四种染色方法中只需取一种即可，建议用一种，操作快效果好。
染色结果：胞核呈紫蓝色，胞浆呈红色，红细胞呈桔红色，其它成分呈深浅不同红色。
四．注意事项
⒈ 若染色较浅，可重复染色一次；
⒉ 冰冻切片用防脱载玻片，切好的片子如不及时染色可放-20℃保存，染色前不要用乙醇等固定，否则易造成掉片。
⒊ 如果伊红染色太深，可延长水冲时间或者是再重复梯度脱水一次。
五．产品优点
1. 本染液，环保，对人体无伤害，染液内不含汞，甲醇等有毒试剂，可保护操作人员的健康。
2. 操作简便，核染色与浆染液二步染色，染色清晰。
3. 快速从染色至封片，观察多 8-10 分钟。
4. 试剂保存时间长，不易产生沉淀和金属氧化膜。
5. 封片后玻片长期保存。
附：样本前处理
石蜡切片：
1. 脱蜡：用环保脱蜡剂或二甲苯脱蜡，每次 10-15 分钟，共二次。
2. 梯度入水：样本玻片侵入 95%、70%、30%乙醇各 2 分钟，温水 2 分钟，如果脱蜡不干净。需再次温水 2 分钟。此时玻片上除样本部分略有水分外，拨片的其余部分均应无水珠。
冰冻切片：
1. 回温：将预先制作好并保存在-20℃冰箱中的冰冻切片取出回温，取以下方法中一种：
① 室内自然回温；
② 可放到 37℃孵育箱中进行回温；
③ 在 37℃水浴箱中放置一个小盒子，再将从冰箱中取出的切片架放到小盒当中，目的是让冰冻切片回温到 37℃。
2. 水合：将回温好的切片，水中浸泡 30-60 秒左右。
血涂片及骨髓涂片：
1. 推片：去全血 3 微升左右置载玻片上，将推玻片与载玻片 30 度角，置于血滴正前方，稍往后移与血滴接触，血滴沿推片下缘散开，再匀速沿载玻片平面平稳向前滑动，至血滴铺完血膜为止。
2. 涂片空气中自然干燥，95%乙醇固定 2-3 分钟，水洗约 30-60秒。
