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人白介素-1 受体样1(IL-1RL1)试剂盒实验原理

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  • 更新日期:2017-06-26 12:39
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详细介绍
人白介素-1 受体样1(IL-1RL1)试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白介素-1 受体样 1(IL-1RL1)水平。用纯化的
人白介素-1 受体样 1(IL-1RL1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次
加入白介素-1 受体样 1(IL-1RL1),再与 HRP 标记的白介素-1 受体样 1(IL-1RL1)抗体结合,
形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催
化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的白介素-1 受
体样 1(IL-1RL1)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲
线计算样品中人白介素-1 受体样 1(IL-1RL1)浓度。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
400pg/ml 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液
200pg/ml 4 号标准品 150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
100pg/ml 3 号标准品 150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
50pg/ml 2 号标准品 150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
25pg/ml 1 号标准品 150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,
然后再加待测样品 10μl(样品终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
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