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大鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒使用说明书

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  • 更新日期:2017-01-09 11:26
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详细介绍
 大鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 大鼠肾上腺髓质素(ADM)水平。用纯化的 大鼠肾上腺髓质素(ADM)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肾上腺髓质素(ADM)再与HRP标记的肾上腺髓质素(ADM)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的肾上腺髓质素(ADM)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中 大鼠肾上腺髓质素(ADM)浓度。
操作步骤
标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为36ng/L,24ng/L ,12ng/L,6ng/L, 3ng/L)。
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
温育:操作同3。
洗涤:操作同5。
显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 
终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
大鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒
N,N-二乙基甲胺 3-氯-2-甲氧基砒啶 2-溴-5-硝基苯甲腈
N-(4-氯苯甲酰基)-酪胺 3-三氟甲基苯甲酸甲酯 4-甲基-5-甲酸基-1,3-噁唑
2-甲氧基-5-甲基苯酚 2-溴-4-甲基-5-硝基吡啶 4-(三氟甲基)硫代苯甲酰胺
2-碘三氟甲氧基苯 6-叔丁基-3H-噻吩[2,3-D]嘧啶-4-酮 4-氯-2-硝基苯甲醚
2-溴-4-(三氟甲基)苯甲腈 1-甲基-3-硝基胍 1-甲磺酰基-2-咪唑烷酮
2-环戊烷乙醇 1-溴-3-苯氧基丙烷 (氯甲基)三苯基氯化磷
3,6-二羟基萘-2,7-二磺酸二钠 五氨基氟丙基氢氧吡啶 3,5-二溴苯硼酸
D-对羟基苯甘氨酸甲酯盐酸盐 邻氯苯甲酸乙酯 香草醇丁醚
2,4-二溴苯酚 5-溴戊酸乙酯 3-溴-4-羟基吡啶
6-溴-4-二氢色原酮 2-甲氧基-5-吡啶硼酸频哪醇酯 2,4-二甲氧基苯甲胺
大鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒
 
 
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