本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肌酐(Cr)水平。用纯化的人肌酐(Cr)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肌酐(Cr),再与HRP标记的肌酐(Cr)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的肌酐(Cr)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人肌酐(Cr)浓度。
人肌酐(Cr)ELISA试剂盒操作步骤
标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为60μmol/L,40μmol/L ,20μmol/L,10μmol/L,5μmol/L)。
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
温育:操作同3。
洗涤:操作同5。
显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 人肌酐(Cr)ELISA试剂盒
5-硝基吡唑-3-羧酸乙酯 锌单钠盐 5-氯-2,4-二氟苯腈
3,5-二溴-4-硝基吡唑 对氨基苯甲酰氨基苯甲酰胺 2-氯-5-甲基吡啶
2-溴-5-碘吡啶 庚酸氯 2,3-二氯噻吩
2-氨基恶唑 1-(3-羟基苯基)-2-[甲基(苯甲基)氨基]-乙酮盐酸盐 DL-多巴/3,4-二羟基苯丙氨酸
2,4-二氯-5-氟苯乙酮 1,10-二氯癸烷 2-溴-5-羟基苯甲醛
5-甲基-3(2H)-哒嗪酮 4-溴-3-氟苯甲醚 5-氮杂吲哚
8-羟基-1,2,3,4-四氢喹啉 N-乙酰基-5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)-2'-脱氧胞苷 2-氰基呋喃
1-[2-氨基-1-(4-甲氧基苯基)乙基]环己醇盐酸盐 5-氯-2-(4-氯苯氧基)-苯胺 反-4-(反-4-丙基环己基)环己醇
反式-4-(4-戊基环己基)苯腈 2-氯-5-三氟甲氧基苯硼酸 环丙甲酸甲酯
3-氯肉桂酸 5-氯-2-三氟甲基苯甲醛 四溴甲苯
2-氟-4-硝基苯腈 2,4-己二酮 4-氨基二苯醚
紫外线吸收剂 THUV-328 3-吡啶乙酸 对甲基肉桂酸甲酯
6-异丙基-9-甲基-1,4-二氧螺环[4,5]癸烷-2-甲醇 3-氯磺酰基-4-氟苯甲酸 反式-4-(反式-4'-丁基环己基)环己基甲酸





