冰冻切片快速抗原修复液(5×)说明书

Cat number：KFS006

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一、 试剂盒说明

冰冻切片快速抗原修复液(Quick Antigen Retrieval Solution for Frozen Sections)是一种特别适合用于冰冻切片的快速抗原修复液，只需室温孵育 5 分钟即可完成对冰冻切片样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。

细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后，会导致蛋白之间的交联(cross-link)，从而遮蔽样品的抗原位点，导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果。

本抗原修复液含有了广泛使用的 SDS 等抗原修复试剂等，pH 值约为 7.4，可以快速有效地去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。

通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果，但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时，可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看，无论冰冻切片还是细胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品，进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联，充分暴露抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。

本产品特别适合用于冰冻切片的抗原修复并用于后续的免疫染色。

一个包装的本产品可以配制成 500 毫升抗原修复液(1X)。按照每个片子需要 10 毫升抗原修复液(1X)计算，一个包装的本产品可以用于 50 个样品。按照每个片子需要 5 毫升抗原修复液(1X)计算，则一个包装的本产品可以用于 100 个样品。

二、 试剂盒组份

三、使用注意事项

1、 抗原修复过程可以使用染色缸和染色架或邮寄夹进行操作。塑料染色缸、染色架和邮寄

夹可以很好地耐受沸水浴，而玻璃染色缸需避免骤冷骤热导致的玻璃破碎。

2、 本抗原修复液使用前必须先充分溶解并混匀，然后用重蒸水或 MilliQ 水稀释 5 倍，配

制成抗原修复液(1X)。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

四、 操作方法

1. 对于石蜡切片：

a. 脱蜡：切片在二甲苯中脱蜡 5 分钟，再换用新鲜的二甲苯脱蜡，共用二甲苯脱蜡 3 次。无水乙醇 5 分钟，两次。90%乙醇 5 分钟，两次，70％乙醇 5 分钟，一次。蒸馏水 5 分钟，两次。

b. 抗原修复：将切片浸泡在抗原修复液(1X)中，室温孵育 5 分钟。用免疫染色洗涤液洗涤 3-5 次，每次 3-5分钟，以充分去除残留的 SDS 等试剂。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。

2. 对于冰冻切片：

用免疫染色洗涤液洗涤切片 5 分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中，室温孵育约 5 分钟。用免疫染色洗涤液洗涤 3-5 次，每次 3-5 分钟，以充分去除残留的 SDS 等试剂。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。

3. 对于其它样品的抗原修复，可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。