本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Klotho蛋白水平。用纯化的人Klotho蛋白抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入Klotho蛋白，再与HRP标记的Klotho蛋白抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的Klotho蛋白呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人Klotho蛋白浓度。
人Klotho蛋白试剂盒样本处理及要求：
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。酒石酸长春质碱 标准品别名： 英文名称： Catharanthine CAS 编号： 2468-21-5
派利文碱 标准品别名： 英文名称： Perivine CAS 编号： 2673-40-7
尼泊金甲 标准品别名： 尼泊金甲酯 英文名称： Methylparaben CAS 编号： 99-76-3
雷公藤乙素 标准品别名： 雷公藤内酯二醇;雷公藤羟内酯 英文名称： Tripdiolide CAS 编号： 38647-10-8
王不留行黄酮苷 标准品别名： 英文名称： Vaccarin CAS 编号： 53452-16-7
茶黄素-3'-没食子酸酯 标准品别名： TF-3'-G 英文名称： Theaflavin-3'-Gallate CAS 编号： 28543-07-9
仙鹤草酚B 标准品别名： 英文名称： agrimol B CAS 编号： 55576-66-4
镰叶芹二醇 标准品别名： 英文名称： Falcarindiol CAS 编号： 225110-25-8
白术内酯Ⅰ 标准品别名： 苍术内酯Ⅰ 英文名称： Atractylenolide 1 CAS 编号： 73069-13-3
2-金刚烷酮 标准品别名： 金刚烷酮;2-金刚酮;三环[3.3.1.1(3,7)]癸烷-2-酮 英文名称： 2-Adamantanone CAS 编号： 700-58-3
盐酸甜菜碱 标准品别名： 甜菜碱盐酸盐;三甲铵乙内酯盐酸盐;三甲铵乙内酯盐酸盐 英文名称： Betaine hydrochloride CAS 编号： 590-46-5
银杏内酯A 标准品别名： 英文名称： Ginkgolide A CAS 编号： 15291-75-5 人Klotho蛋白试剂盒
20（S)-人参皂苷F2 标准品别名： 英文名称： 20(S)-Ginsenoside F2 CAS 编号： 62025-49-4
竹节香附素A 标准品别名： 英文名称： Raddeanin(Anemodeanin) A CAS 编号： 89412-79-3
脱氢海罂粟碱 标准品别名： 去氢海罂粟碱 英文名称： Dehydroglaucine CAS 编号：
河豚毒素 标准品别名： 河豚毒 英文名称： Tetrodotoxin CAS 编号： 4368-28-9
异连翘酯苷A 标准品别名： 英文名称： Isoforsythiaside CAS 编号： 1357910-26-9
