测定意义:
ATP 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是生物能量通货,能荷是描述细胞能量
代谢状态的主要参数。测定ATP 含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。
测定原理:
肌酸激酶催化肌酸和ATP 反应生成磷酸肌酸,可在700nm 下用磷钼酸比色法检测磷酸肌酸
含量,以此反应ATP 含量。
自备仪器和用品:
分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、微量石英比色皿/96 孔板、研钵和蒸馏水。
试剂组成和配制:
酸性提取液:液体60mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:液体60mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:粉剂×1 支,4℃保存;临用前加入1mL 蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装
后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂二:液体1.5mL×1 支,4℃保存;
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入500μL 蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装
后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四:液体5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂五:液体25mL×1 瓶,4℃保存;
标准液:液体10mL×1 瓶,2μmol/mLATP 标准液,4℃保存;





