总一氧化氮检测试剂盒使用说明

 总一氧化氮检测试剂盒(Total Nitric Oxide Assay Kit, 即Nitrate/Nitrite Assay Kit)采用了硝酸盐还原酶(Nitrate reductase)还原

硝酸盐(nitrate)为亚硝酸盐(nitrite)，然后通过经典的Griess reagent检测亚硝酸盐，从而测定出总一氧化氮。一氧化氮本身

不稳定，在细胞内很快代谢为硝酸盐(Nitrate)和亚硝酸盐(Nitrite)，通过上述方法检测出硝酸盐和亚硝酸盐的总量，就可

以推算出总的一氧化氮的量。

 本试剂盒采用了NADPH依赖性硝酸盐还原酶(NADPH dependent nitrate reductase)。高浓度的NADPH会干扰后续的检测，

消除NADPH的一种常用方法就是使用Lactate dehydrogenase (LDH)清除NADPH。本试剂盒采用了LDH清除NADPH的方

法，使检测结果更加准确。

 对亚硝酸盐的检测下限达到2微摩尔/升，在2-80微摩尔/升的范围内有很好的线性关系。浓度过高的样品可以适当稀释后

再进行检测。

 样品范围广，可以检测细胞裂解液、组织裂解液、细胞或组织的培养液、血清、血浆或尿液等中一氧化氮的含量。酚红

和10%血清对测定无明显干扰。

 样品需要量少。根据样品中一氧化氮的浓度不同，仅需0-60微升样品。

 检测速度快，仅需约80分钟即可完成检测。

 本试剂盒采用了间接的一氧化氮检测方法，如需检测细胞内实际的一氧化氮水平，可以采用我公司生产的DAF-FM DA

(NO荧光探针)(YT285)。