HR8094 真菌蛋白提取试剂盒(蛋白组实验、质谱适用)

本试剂盒的蛋白提取组份中不含有不可透析除去的去垢剂组份，不含SDS、TritonX-100、chaps 等可能影响质谱实验的组份，最后得到的蛋白质样品经过透析或者脱盐处理后将不含有去垢剂、高浓度盐等影响，基本可以满足下游任意的蛋白质组学相关实验研究。

北京百奥莱博科技有限公司是一家专业的生物试剂销售公司。公司主要经营血清、抗原、抗体等生物试剂产品，可以为您提供专业的技术服务，以优良的价格、优质的服务、优先的理念，满足客户的各方面的需求，与国内多家企业、单位建立了良好的长期合作关系，拥有较好的企业信誉和品牌形象。

真菌蛋白提取试剂盒(蛋白组实验、质谱适用)产品特点：

● 使用方便，从细胞，组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。

● 提取过程简单方便，将蛋白提取的时间缩短至30 分钟-1 小时。

● 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

● 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

● 总蛋白提取液含多种有效成分，可充分释放胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。

● 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含5 种独立的蛋白酶抑制剂Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

真菌蛋白提取试剂盒(蛋白组实验、质谱适用)试剂盒以外自备仪器和试剂耗材：

● 涡旋混匀器  ● 离心机 ● 振荡器 ● 移液器 ● PBS（pH7.4，1×）

注意事项：

● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

● 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

● 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

真菌蛋白提取试剂盒(蛋白组实验、质谱适用)使用方法：

1、提取液制备：

将试剂A1和试剂A2混合，配成蛋白提取液A，充分混匀备用。

每500μL真菌蛋白提取液A中加入2μL蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。

【注】：

● 蛋白提取液A置4℃保存，长期不用的可以分装后-20℃保存。

● 根据需要处理的样品数量准备蛋白提取液，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。

● 加过蛋白酶抑制剂的提取液一周内未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制剂。

2、取培养丝状真菌，在4℃，5000×g条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集菌体。

3、用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

4、将菌体置于研钵中用液氮研磨至粉末。

【注】：

● 若无液氮研磨条件，可直接用蛋白提取液研磨。

5、每100mg菌体中加入300μL-500μL蛋白提取液，混匀后，在2-8℃条件下振荡20-30分钟。

【注】：

● 使用振荡器/摇床的较低转速，提取液能轻微晃动即可。

● 没有振荡条件也可以不振荡，稍微延长提取液的处理时间，中间每隔几分钟用移液器吹打混匀即可。

6、在4℃，12000×g条件下离心10分钟。

7、将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到真菌总蛋白。

8、将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或用于下游实验。

【注】：

● 建议用BCA法进行蛋白定量。相关产品：HR0329。

● 蛋白样品-80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。

9、将蛋白样品透析处理或者脱盐柱脱盐处理后用于下游实验。

【注】：

● 经透析或脱盐离心柱处理的蛋白样品不含有去垢剂盒高浓度盐。

常见问题分析：

● 蛋白浓度低？

处理部分组织样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂A的处理时间即可。最好在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。

● 用什么方法定量蛋白？

建议用BCA法，或者Bradford法。

● 提取的蛋白具有活性吗？

本试剂盒不含有离子型去垢剂组份，不破坏蛋白的结构，没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏，蛋白均保持其天然构象和活性。

本页产品地址：http://www.geilan.com/sell/show-9451245.html