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价格：电议
所在地：上海
型号：
更新时间：2021-01-29
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公司地址：上海市青浦区徐泾镇振泾路198号
常婕(女士)
血液基因组提取试剂盒（高盐法）
产品货号：28102
产品规格：50 次/100 次/200 次
产品简介：
血液基因组提取试剂盒（高盐法）采用高盐法提取血液中的基因组 DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有 机化合物。提 取的基因组 DNA 的片段大，纯度高，质量稳定可靠。 使用本试剂盒回收的 DNA 可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern 杂交等实验。
包装清单：
| 产品名称 | 50次包装 | 100次包装 | 200次包装 | 储存条件 |
| Buffer A | 30ml | 60ml | 120ml | 室温 |
| Buffer B | 25ml | 50ml | 100ml | 室温 |
| SDS Solution | 3ml | 5ml | 10ml | 室温 |
| High Salt Buffer | 20ml | 40ml | 80ml | 室温 |
| Washing Buffer | 10ml | 20ml | 40ml | 室温 |
| Buffer EB | 5ml | 10ml | 20ml | 室温 |
| Proteinase K溶液 | 0.3ml | 0.5ml | 1ml | -20℃ |
血液基因组提取试剂盒（高盐法）自备试剂：
使用前 Washing Buffer 试剂 50 次加入 40ml 无水乙醇/100 次加入 80ml 无水乙醇/200 次加入 160ml 无水乙醇
操作步骤：
以下步骤以提取 0.2ml 血液中基因组为例，具体实验可根据血液量等比例减少。
1. 于离心管中加入 0.2ml Buffer A 和 0.2ml 预冷的超纯水。上下颠倒 6-8 次，冰上孵育 2-3min；
2. 3500rpm 离心 15min，弃上清；
3. 于沉淀中加入 0.2ml 的 Buffer A 及 0.6ml 的超纯水，涡旋 30s，3500rpm 离心 15min，弃上清；
4. 重复步骤 2-3；
5. 于沉淀中加入 0.5ml Buffer B，50μl SDS Solution 溶液，剧烈涡旋 30-60s 至沉淀重悬，加入 5μLProteinase K 溶液；
6. 充分颠倒混匀，56℃放置 0.5-2h，其间颠倒混匀数次，溶液应变清亮（如溶液未彻底变清亮，请延长裂解时 间至溶液清亮为止）。 注意：加入缓冲液 Buffer B 时可能会产生白色沉淀，一般 37℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变 清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取 DNA 量少和提取出的 DNA 不纯，需等比例补加 Buffer B 及 Proteinase K。
7. 将离心管冰上孵育 2-3min 至冷却，加入 High Salt Buffer0.4ml，剧烈涡旋 15s；
8. 12000rpm 离心 5min，将上清收集于一新的离心管中，加入等体积预冷的异丙醇，上下颠倒 5-6 次以沉淀析 出 DNA；
9. 12000rpm 离心 10min，吸弃上清，加入 1ml Washing Buffer ，轻轻吹起沉淀后 12000rpm 离心 10min，吸弃 上清。
10. 将离心管室温干燥，加入 20-50μl Buffer EB 重新溶解沉淀 DNA。-20℃保存 DNA。
注意事项：
1. 首次使用前应按照试剂瓶标签的说明在 Buffer PW 中加入无水乙醇。
2. 若 Buffer B 中有沉淀，可在 37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
3. 所有离心步骤均可室温下进行。
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